ویدیو های آموزشی, کشت سلول
دفریز کردن سلول های جانوری
آموزش دیفریز کردن سلول | آموزش دیفریز کردن سلول های جانوری
• به منظور کشت دادن سلول های فریز شده بعد از خروج کرایو ویال از تانک ازت با استفاده از گرمای دست و یا بن ماری ۳۷ درجه محتویات داخل کرایو ویال را ذوب می کنیم.
• باید توجه داشت ذوب نباید کامل انجام شود و فقط تا زمانی که قطعه منجمد داخل ویال از دیواره آن جدا شود این عمل را انجام می دهیم.
• سپس محتویات کرایو ویال را داخل فالکون خالی کرده و جهت خنثی کردن اثر DMSO مقداری بافر فسفات سالین و یا محیط کشت به آن اضافه می کنیم.
• فالکون را به دور ۱۵۰۰ آر پی ام و به مدت ۵ الی ۱۰ دقیقه سانتریفیوژ می کنیم. پس از اتمام سانتریفیوژ رسوب سلولی کف فلاسک تشکیل می شود.
• مایع رویی فالکون را خالی کرده و مقدار کمی محیط کشت بدون FBS به آن اضافه کرده و بعد آن را تا زمانی که رسوب سلولی در آن حل شود پیپتاژ می کنیم.
• در نهایت محتویات فالکون را به فلاسک مورد نظر منتقل می کنیم.
• حتی سلول های چسبنده نیز در این حالت به شکل گرد دیده می شوند و مورفولوژی مشخص خود را ندارند.
• در نهایت با رعایت نکات استفاده از انکوباتور های کشت سلولی فلاسک خود را درون انکوباتور Co2 ست شده در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد قرار می دهیم.
سلام اگه میشه راجع به تست های dapi و annexin v هم توضیح بدین
سلام دوست عزیز درمورد دپی میتوانید از طریق لینک زیر مطالعه بفرمایید در مورد انکسین هم مطالب به سایت قطعا افزوده خواهد شدو همکاران متخصص ما با شما برای پاسخ به سوالاتتون تماس خواهند گرفت.
دپی