U87 چیست؟

در زیست شناسی سلولی ، U87 یک رده سلولی اولیه گلیوبلاستومای انسانی است که معمولاً در پروژه های تحقیقاتی بر روی سرطان مغز استفاده می شود.

تاریخچه و مشخصات

به طور رسمی با نام U-87 MG (مخفف Uppsala 87 Malignant Glioma) شناخته می شود ، رده سلولی U87 دارای مورفولوژی اپیتلیالی است و در سال 1966 در دانشگاه اوپسالا از یک بیمار زن 44 ساله به دست آمد. این سلول در سال 1973 در مرکز سرطان Memorial Sloan Kettering نهشته شد و پس از آن ATCC آن را در سال 1982 به دست آورد. با این حال ، در سال 2016 مشخص شد که نسخه روتین استفاده شده از U87MG (به دست آمده از ATCC) غیر مشابه با بیماری بود که در ابتدا این سلول از آن گرفته شده بود. توالی کامل ژنوم U-87 MG در PLoS Genetics منتشر شده است. U-87 MG را می توان از ATCC  بدست آورد که در آنجا با شماره دسترسی HTB-14 شناخته می شود و گزارش شده است که رده سلولی از یک بیمار مرد در سن نامشخص است.

شرایط رشد

محیط کشت مناسب برای U87 به طور کلی شامل EMEM + 10٪ FBS + 100 U/mL پنی سیلین + 100 میکروگرم / میلی لیتر استرپتومایسین می باشد. شرایط مناسب برای رشد؛ دمای 37 درجه سانتیگراد و 5 درصد دی اکسید کربن جو است.

پاساژ سلولی

حجم های استفاده شده در این پروتکل برای به فلاسک های T75 مناسب است است:

محیط کشت رویی را خارج کرده و دور بریزید.

برای از بین بردن اثر مواد موجود در سرم که مهار کننده های تریپسین، سلول ها را به آرامی شست و شو دهید.

سپس 2 الی 3 میلی لیتر محلول Trypsin-EDTA به فلاسک اضافه کنید و سلول ها را زیر میکروسکوپ معکوس بررسی کنید تا لایه ای از سلول های پراکنده مشاهده شود. معمولا 5 الی 10 دقیقه به طول می انجامد.

توجه: برای جلوگیری از تجمع سلول ها با تکان دادن فلاسک در حین انتظار آن ها را تحریک نکنید. سلول هایی که جدا شدن آن ها دشوار است باید در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار گیرند تا فرآیند را تسهیل کند.

برای خنثی کردن اثر تریپسین، هم حجم محلول اضافه شده (2 الی 3 میلی لیتر) از محیط کشت کامل را به آرامی به فلاسک اضافه کرده و پیپت کنید.

پلت سلولی را در محیط کشت تازه مجددا سوسپانس کنید. مقدار مناسبی از سوسپانسیون سلولی را به ظروف جدید مناسب منتقل کنید.

کشت انجام شده را در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه کنید.

برای این رده سلولی، توصیه می شود که 2 تا 3 بار در هفته تعویض محیط انجام گیرد.

محیط کشت مناسب برای تهیه فریز: 95 % محیط کشت پایه و 5 % DMSO

شرایط مناسب برای کشت: 5٪ CO2 جوی و دمای 37 درجه سانتی گراد

مطالعات بیشتر در بخش راهنمای علمی سایت