مقدمه‌ای بر TBST
در زیست شناسی مولکولی، TBST یا TTBS، مخلوطی از تریس بافر سالین (TBS) و Polysorbate 20 است که به آن Tween 20 نیز می گویند. این محلول یک بافری است که برای شستشوی غشا نیتروسلولز در تکنیک western blotting و چاهک های پلیت میکروتیتر در تکنیکELISA استفاده می شود. Tris یک بافر برای pH است که معمولاً pH را در حدود pH = 8حفظ می کند. بافر سالین نمکی است که محلول ایزوتون را فراهم می کند. توئین صابونی است که قطرات چربی را از بلات یا چاهک ها پاک می کند.
مواد مورد نیاز برای ساخت TBS-Tween
- تریس
- NaCl
- Tween 20
pH نهایی را می توانید با HCl بین pH 7.4-7.6 تنظیم کنید
ساده ترین راه تهیه محلول TBS-Tween استفاده از قرص های TBS-T است. این قرص ها به نحوی فرموله شده اند تا بافر TBST را در 500 میلی لیتر آب دیونیزه شده تهیه کنند.
بافر TBS حاوی 0.1% Tween® 20 به عنوان دترجنت، یک بافر شستشوی بسیار مناسب و موثر برای بسیاری از تکنیک های ایمنی است.
غلظت محلول ها:
تریس: 20 میلی مولار
NaCl: 150 میلی مولار
Tween® 20 detergent: 0.1% (w/v)
نحوه تولید 1 لیتر بافر TBST
- 100 میلی لیتر از محلول استوک TBS 10X
- 900 میلی لیتر آب مقطر
- 1 میلی لیتر دترجنت Tween® 20
مواد بالا را با یکدیگر ترکیب کرده و نهایتا به حجم 1 لیتر برسانید.
