سانتریفیوژ

جداسازی ترکیبات بر اساس وزن مولکولی با به کار گیری نیروی گریز از مرکز می­باشد. این دستگاه با چرخاندن مواد در سرعت­های بالا موجب جداسازی ترکیبات می­شود. در نتیجه باعث ایجاد فازهای جدا از هم می­شود. محلول می­تواند مخلوطی از 2 مایع یا جامد در مایع باشد. فاز جامد به شکل رسوب و فاز مایع بالای آن قرار می گیرد. سلول­ها دارای مولکول­های اصلی از جمله: لیپیدها، کربوهیدرات­ها، پروتئین­ها و اسیدهای نوکلئیک می باشند که با استفاده از این دستگاه در دورهای مختلف، هر یک از آن­ها را جدا کرد.

این دستگاه معمولا دارای سرعت و زمان چرخش قابل تنظیم می­باشند. سرعت با 2 واحد Rpu و RCF معرفی می­شود که RPM به معنای تعداد دورهایی است که روتور سانتریفیوژ در یک دقیقه می زند.

RCF که به معنی نیروی نسبی سانتریفیوژ می باشد.

از نظر تقسیم بندی به 4 گروه تقسیم می­شوند:

1-سانتریفیوژ معمولی دور پایین

2- سانتریفیوژ معمولی دور بالا

3-سانتریفیوژ یخچال دار دور بالا (میکروفیوژ )

4-اولتراسانتریفیوژ

سانتریوفیوژهای دارای سیستم یخچالی برای ترکیباتی که حساس به دما می باشند بسیار مناسب است مانند پروتئین­ها.

این دستگاه در پروسه  DNA-RNA extraction کاربرد دارد به معنای چرخاندن نمونه­ها در حجم کم و دور بالا استفاده می­شود. معمولا برای جداسازی ذرات جامد از یک مایع یا       مخلوط مایعات استفاده می­شود. برای استخراج RNA از بافت، سلول، خون و ….. در آزمایشگاه مولکولی بسیار پر کاربرد می باشد. پروتکل استخراج بدین صورت می­باشد که نمونه پس از هموژنایز شدن و اضافه شدن        بایستی در دمای 4 درجه و دور بالا (معمولا 12000) به مدت مشخص توسط دستگاه میکروفیوژ چرخانده شود تا نمونه به 3 فاز جدا شود که مایع رویی (supernant) که اسیدنوکلئریک می باشد برای ادامه پروتکل جدا می­شود که پس از چند مرحله شستشو RNA خالص استخراج می­شود.

سوالات:

1-کاربرد شیب دامنه چیست؟

شیب دامنه در دستگاه­های سانتریفیوژ دارای این آپشن، اپراتور را قادر می­سازد تا سرعت به دور رسیدن موتور دستگاه را از لحاظ بازه زمانی تنظیم نماید که بین 9-1 متغیر است و هرچه عدد بزرگتر شود مدت زمان رسیدن به دور در دقیقه مورد نظر مدت زمان کوتاه می­شود.

2-RPM چیست؟ جزء مولفه­های مهم دستگاه می­باشد که به سرعت چرخش (دور در دقیقه) گفته می­شود.

3-RCF چیست؟ نیروی نسبی گریز از مرکز را گویند.

4-g-force چیست؟ سانتریفیوژ مورد استفاده در آزمایشگاه­ها دارای نیروی گریز از مرکز می­باشند که به آن g-force گویند. اساس کار آن بدین شکل است که روتور حول یک محور ثابت چرخانده می­شود که این چرخش توسط موتور الکتریکی صورت می­گیرد تا با توجه به چگالی، مواد مختلف را از یکدیگر جدا می­کند.

4-تفاوت RPM و RFC در چیست؟ دستگاه با دو روتور قطرهای متفاوت سرعت چرخش یکسانی دارند که باعث تولید نیروی نسبی گریز از مرکز می­شود.