3,300,000 تومان–4,070,000 تومان
راهنمای خرید رده سلولی U-87 MG
U-87 MG یک رده سلولی با مورفولوژی اپیتلیال است که از گلیوماهای بدخیم یک بیمار مرد، احتمالاً مبتلا به گلیوبلاستوما، جدا شده است. از این سلول ها در تحقیقات علوم اعصاب و ایمنی-انکولوژی استفاده می شود.
سطح ایمنی زیستی: BSL1 (بیشتر بدانید)
| رده محصولات | سلول های انسانی |
| ارگانیسم | انسان خردمند، انسان |
| مورفولوژی | اپیتلیال |
| بافت | مغز |
| بیماری | گلیوبلاستوما |
| کاربردها | کشت سلولی سه بعدی
علوم اعصاب ایمونوانکولوژی |
| شرایط نگهداری | فاز بخار نیتروژن مایع |
| استفاده در نظر گرفته شده | این رده سلولی میزبان ترانسفکشن مناسبی است. |
| حجم فلاسک | T25, T75 |
|---|
خصوصیات
| خصوصیات رشد | چسبنده |
| استخراج: | این یکی از رده های سلولی است که از گلیوماهای بدخیم مشتق شده است توسط J. Ponten و همکارانش از سال 1966 تا 1969 |
| قومیت | ناشناس |
| جنسیت | مرد |
| کاریوتایپ | این یک رده سلولی هیپودیپلوئید انسانی با تعداد کروموزوم مدال 44 است که در 48 درصد سلول ها وجود دارد. میزان پلوئیدی بالاتر 5.9 درصد بود، دوازده نشانگر برای همه سلول ها مشترک بود، از جمله der(1)t(1;3) (p22;q21)، der(16)t(1;16) (p22;p12). ، del(9) (p13) و نه نفر دیگر. نشانگر der(1) دو نسخه در اکثر سلول ها داشت. فقط یک کپی از X معمولی وجود داشت. N1، N6 و N9 یافت نشد. |
| ادرار زا | آره؛ بله، در موش های برهنه(Nude Mice) تلقیح زیر جلدی با 10(7) سلول |
| ایزوآنزیم ها | AK-1, 1
ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1 Me-2, 1 PGM1, 2 PGM3, 1 |
| نظرات | آلودگی مایکوپلاسما در سپتامبر 1975 از بین رفت. رده سلولی ATCC® HTB-14™ در سال 1982 در ATCC سپرده شد.
پروفایل STR، رنگ کروموزوم Y، و سنجش باند Q تایید کردند که رده سلولی منشأ مذکر است. بر اساس ادبیات فعلی، رده سلولی احتمالاً یک گلیوبلاستوما با منشا CNS است. |
اطلاعات نگهداری
| دستورالعمل باز کردن و ذخیره سازی
|
1- تمام ظروف را از نظر نشتی یا شکستگی بررسی کنید.
2- سلول های یخ زده را از بسته بندی یخ خشک خارج کرده و بلافاصله سلول ها را در دمای زیر 130- درجه سانتی گراد ترجیحاً در بخار نیتروژن مایع قرار دهید تا آماده استفاده شود.
|
| محیط کامل
|
محیط پایه برای این رده سلولی DMEM High Glucose / α MEM
برای ساختن محیط رشد کامل، سرم جنین گاوی به غلظت نهایی 10%را به محیط پایه اضافه کنید.
|
| درجه حرارت | 37 درجه |
| شرایط نگهداری
|
برای اطمینان از بالاترین سطح زنده ماندن، ویال را ذوب کرده و در اسرع وقت پس از دریافت، کشت را آغاز کنید. اگر در بدو ورود، ادامه نگهداری کشت منجمد ضروری باشد، باید در فاز بخار نیتروژن مایع و نه در دمای 70- درجه سانتی گراد نگهداری شود. نگهداری در دمای 70- درجه سانتیگراد باعث از بین رفتن قابلیت زنده ماندن می شود.
1- ویال را با هم زدن ملایم در حمام آب 37 درجه سانتی گراد ذوب کنید. برای کاهش احتمال آلودگی، O-ring و کلاهک را خارج از آب نگهدارید. ذوب شدن باید سریع باشد (تقریباً 2 دقیقه). 2- به محض ذوب شدن محتویات، ویال را از حمام آب خارج کرده و با غوطه ور کردن یا پاشیدن با اتانول 70 درصد آن را ضدعفونی کنید. تمام عملیات از این نقطه به بعد باید در شرایط سخت اسپتیک انجام شود. 3- محتویات ویال را به یک فلاسک کشت بافت 75 سانتی متر مربعی منتقل کنید و با محیط کشت کامل توصیه شده رقیق کنید (اطلاعات دسته ای خاص را برای نسبت رقت توصیه شده ببینید). مهم است که از قلیایی بودن بیش از حد محیط در طول بازیابی سلول ها جلوگیری شود. پیشنهاد می شود، قبل از افزودن محتویات ویال، ظرف کشت حاوی محیط رشد حداقل به مدت 15 دقیقه در انکوباتور قرار داده شود تا محیط به pH طبیعی خود (0/7 تا 6/7) برسد. 4- کشت را در دمای 37 درجه سانتی گراد در انکوباتور مناسب انکوبه کنید. در صورت استفاده از محیطی که در این برگه محصول توضیح داده شده است، %5 CO2 در جو هوا توصیه می شود. اگر مایل هستید که عامل محافظ انجماد فوراً حذف شود یا سوسپانسیون سلولی غلیظ تری به دست آید، سوسپانسیون سلولی را در حدود g× 125 به مدت 5 تا 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید. مایع رویی را دور بریزید و سلول ها را با محیط رشد تازه با نسبت رقت توصیه شده در اطلاعات دسته خاص، مجدداً معلق کنید.
|
| روش پاساژ دادن
|
حجم ها برای یک فلاسک 75 سانتی متر مربع داده شده است. مقدار محیط تفکیک مورد نیاز را متناسب با ظروف کشت با اندازه های دیگر افزایش یا کاهش دهید.
1- محیط کشت را بردارید و دور بریزید. 2- به طور خلاصه لایه سلولی را با محلول 25/0% تریپسین و 53/0میلی مولار EDTA شستشو دهید تا تمام آثار سرمی حاوی مهارکننده تریپسین پاک شود. 3- 2 تا 3 میلی لیتر محلول Trypsin-EDTA را به فلاسک اضافه کنید و سلول ها را زیر میکروسکوپ معکوس مشاهده کنید تا لایه سلولی پراکنده شود (معمولاً در عرض 5 تا 15 دقیقه). توجه: برای جلوگیری از انباشته شدن، سلول ها را با ضربه زدن یا تکان دادن فلاسک تکان ندهید در حالی که منتظر جدا شدن سلول ها هستید. سلول هایی که به سختی جدا می شوند ممکن است در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار داده شوند تا پراکندگی آنها تسهیل شود. 4- 6 تا 8 میلی لیتر از محیط رشد کامل را اضافه کنید و سلول ها را با پیپت کردن به آرامی آسپیره کنید. 5- مقدار مناسبی از سوسپانسیون سلولی را به ظروف کشت جدید اضافه کنید. 6- کشت ها را در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه کنید. نسبت پاساژ: نسبت ساب کالچر 1:2 تا 1:5 توصیه می شود. تعویض محیط: 2 تا 3 بار در هفته |
| مواد برای انجماد
|
95% محیط کامل + 5% v/v DMSO |
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.