3,300,000 تومان–4,070,000 تومان
راهنمای خرید رده سلولی PC-12
PC-12 یک رده سلولی است که از فئوکروموسیتوم موش صحرایی قابل پیوند مشتق شده است. این رده سلولی را می توان در تحقیقات علوم اعصاب و سم شناسی استفاده کرد.
سطح ایمنی زیستی: BSL1 (بیشتر بدانید)
کاتالوگ انگلیسی ATCC رده سلولی PC-12
| رده محصولات | سلول های حیوانی |
| ارگانیسم | Rattus norvegicus موش صحرایی |
| مورفولوژی | سلول های کوچک با شکل نامنظم |
| بافت | غده ادرنال |
| بیماری | فیتوکروموسیتوما |
| کاربرد ها | کشت سه بعدی
علوم اعصاب سم شناسی غربالگری با کارایی بالا |
| شرایط نگهداری | فاز بخار نیتروژن مایع |
| استفاده در نظر گرفته شده | این محصول فقط برای استفاده تحقیقات آزمایشگاهی در نظر گرفته شده است. این برای هیچ گونه استفاده درمانی حیوانی یا انسانی، مصرف انسانی یا حیوانی، یا هر گونه استفاده تشخیصی در نظر گرفته نشده است.
این رده سلولی میزبان ترانسفکشن مناسبی است. |
| حجم فلاسک | T25, T75 |
|---|
خصوصیات
| خصوصیات رشد | مخلوط: توده های شناور سلول های گرد با تعدادی سلول متصل |
| استخراج | رده سلولی PC-12 از یک فئوکروموسیتوم موش صحرایی قابل پیوند مشتق شد. |
| سن | 54 ساله |
| جنسیت | مرد |
| کاریوتایپ | 40 کروموزوم؛ 38 اتوزوم به اضافه XY |
| تومورزایی
|
بله، در بیمارستان دیاکونس نیوانگلند، موش‌های صحرایی مورد استفاده قرار گرفتند |
| ژنهای بیان شده | کاتکول آمین ها: دوپامین؛ نوراپی نفرین |
| مارکرهای بیانی | فاکتور رشد عصبی |
| نظرات | هنگامی که روی فلاسک های کشت پوشش داده شده با کلاژن IV قرار می گیرند، سلول ها با القای فنوتیپ عصبی به NGF برگشت پذیر پاسخ می دهند. سلول ها اپی نفرین را سنتز نمی کنند. |
اطلاعات نگهداری
| دستورالعمل باز کردن و ذخیره سازی
|
1- تمام ظروف را از نظر نشتی یا شکستگی بررسی کنید.
2- سلول های یخ زده را از بسته بندی یخ خشک خارج کرده و بلافاصله سلول ها را در دمای زیر 130- درجه سانتی گراد ترجیحاً در بخار نیتروژن مایع قرار دهید تا آماده استفاده شود.
|
| محیط کامل
|
محیط پایه برای این رده سلولی DMEM High glucose
برای ساختن محیط رشد کامل، سرم جنین گاوی به غلظت نهایی 5%را به محیط پایه اضافه کنید.
|
| درجه حرارت | 37 درجه |
| شرایط نگهداری
|
برای اطمینان از بالاترین سطح زنده ماندن، ویال را ذوب کرده و در اسرع وقت پس از دریافت، کشت را آغاز کنید. اگر در بدو ورود، ادامه نگهداری کشت منجمد ضروری باشد، باید در فاز بخار نیتروژن مایع و نه در دمای 70- درجه سانتی گراد نگهداری شود. نگهداری در دمای 70- درجه سانتیگراد باعث از بین رفتن قابلیت زنده ماندن می شود.
1- ویال را با هم زدن ملایم در حمام آب 37 درجه سانتی گراد ذوب کنید. برای کاهش احتمال آلودگی، O-ring و کلاهک را خارج از آب نگهدارید. ذوب شدن باید سریع باشد (تقریباً 2 دقیقه). 2- به محض ذوب شدن محتویات، ویال را از حمام آب خارج کرده و با غوطه ور کردن یا پاشیدن با اتانول 70 درصد آن را ضدعفونی کنید. تمام عملیات از این نقطه به بعد باید در شرایط سخت اسپتیک انجام شود. 3- محتویات ویال را به یک فلاسک کشت بافت 75 سانتی متر مربعی منتقل کنید و با محیط کشت کامل توصیه شده رقیق کنید (اطلاعات دسته ای خاص را برای نسبت رقت توصیه شده ببینید). مهم است که از قلیایی بودن بیش از حد محیط در طول بازیابی سلول ها جلوگیری شود. پیشنهاد می شود، قبل از افزودن محتویات ویال، ظرف کشت حاوی محیط رشد حداقل به مدت 15 دقیقه در انکوباتور قرار داده شود تا محیط به pH طبیعی خود (0/7 تا 6/7) برسد. 4- کشت را در دمای 37 درجه سانتی گراد در انکوباتور مناسب انکوبه کنید. در صورت استفاده از محیطی که در این برگه محصول توضیح داده شده است، %5 CO2 در جو هوا توصیه می شود. اگر مایل هستید که عامل محافظ انجماد فوراً حذف شود یا سوسپانسیون سلولی غلیظ تری به دست آید، سوسپانسیون سلولی را در حدود g× 125 به مدت 5 تا 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید. مایع رویی را دور بریزید و سلول ها را با محیط رشد تازه با نسبت رقت توصیه شده در اطلاعات دسته خاص، مجدداً معلق کنید.
|
| روش پاساژ دادن
|
حجم ها برای یک فلاسک 75 سانتی متر مربع داده شده است. مقدار محیط تفکیک مورد نیاز را متناسب با ظروف کشت با اندازه های دیگر افزایش یا کاهش دهید.
1- محیط کشت را بردارید و دور بریزید. 2- به طور خلاصه لایه سلولی را با محلول 25/0% تریپسین و 53/0میلی مولار EDTA شستشو دهید تا تمام آثار سرمی حاوی مهارکننده تریپسین پاک شود. 3- 2 تا 3 میلی لیتر محلول Trypsin-EDTA را به فلاسک اضافه کنید و سلول ها را زیر میکروسکوپ معکوس مشاهده کنید تا لایه سلولی پراکنده شود (معمولاً در عرض 5 تا 15 دقیقه). توجه: برای جلوگیری از انباشته شدن، سلول ها را با ضربه زدن یا تکان دادن فلاسک تکان ندهید در حالی که منتظر جدا شدن سلول ها هستید. سلول هایی که به سختی جدا می شوند ممکن است در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار داده شوند تا پراکندگی آنها تسهیل شود. 4- 6 تا 8 میلی لیتر از محیط رشد کامل را اضافه کنید و سلول ها را با پیپت کردن به آرامی آسپیره کنید. 5- مقدار مناسبی از سوسپانسیون سلولی را به ظروف کشت جدید اضافه کنید. 6- کشت ها را در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه کنید. تعویض محیط: هر 2 تا 3 روز |
| مواد برای انجماد
|
95% محیط کامل + 5% v/v DMSO |
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.