راهنمای خرید رده سلولی Hela

سطح ایمنی زیستی: BSL2 (بیشتر بدانید)

کاتالوگ انگلیسی ATCC رده سلولی Hela

جهت خرید یا مشاوره با ما تماس بگیرید

رویه تکمیل سفارشات

حجم فلاسک

شناسه محصول: نامعلوم دسته: رده سلولی

رده محصولات	سلول های انسانی
ارگانیسم	انسان، انسان خردمند
مورفولوژی	اپیتلیال
بافت	رحم، دهانه رحم
بیماری	آدنوکارسینوما
کاربردها	توسعه سنجش تحقیق در مورد بیماری های عفونی تحقیق در مورد بیماری های مقاربتی تولید زیستی
شرایط نگهداری	فاز بخار نیتروژن مایع

استفاده در نظر گرفته شده

برای استفاده در آزمایش و کالیبراسیون در آزمایشگاه‌های معتبر ISO 17025، برای به چالش کشیدن عملکرد سنجش، اعتبارسنجی یا مقایسه روش‌های آزمایش، و ایجاد حساسیت، خطی بودن و ویژگی در طول اعتبارسنجی یا پیاده‌سازی سنجش.

این رده سلولی میزبان ترانسفکشن مناسبی است.

این رده سلولی برای غربالگری سویه های اشریشیا کلی با پتانسیل مهاجم مفید است.

حجم فلاسک	T25, T75

خصوصیات

خصوصیات رشد	چسبنده
سن	31 ساله
قومیت	سیاه
جنسیت	زن
کاریوتایپ	شماره معین = 82; محدوده = 70 تا 164 یک کروموزوم تلوسنتریک کوچک در 98 درصد سلول ها وجود دارد. آنوپلوئیدی 100% در 1385 سلول مورد بررسی قرار گرفت. چهار کروموزوم نشانگر HeLa معمولی درمتون علمی گزارش شده است. کروموزوم‌های نشانگر HeLa: یک کپی از Ml، یک کپی از M2، چهار تا پنج نسخه از M3، و دو کپی از M4 که توسط الگوهای باند G آشکار می‌شود. M1 بازوی بلند و سانترومر کروموزوم 1 و بازوی بلند کروموزوم 3 است. M2 ترکیبی از بازوی کوتاه کروموزوم 3 و بازوی بلند کروموزوم 5 است. M3 ایزوکروموزوم بازوی کوتاه کروموزوم 5 است. M4 شامل بازوی بلند کروموزوم 11 و بازوی کروموزوم 19
تومورزایی	بله، در موش های برهنه؛ آدنوکارسینوم با تمایز نسبتاً خوب مطابق با اولیه کولون (درجهII) را تشکیل می دهد.
حساسیت به ویروس:	آدنوویروس انسانی 3 ویروس آنسفالومیوکاردیت ویروس فلج اطفال انسانی 1 ویروس فلج اطفال انسانی 2 ویروس فلج اطفال انسانی 3
بیان کننده ژنهای:	کراتین مثبت با رنگ آمیزی ایمونوپروکسیداز. lysophosphatidylcholine (lyso-PC) باعث فعالیت AP-1 می شود. فعالیت N ترمینال کیناز c-jun (JNK1) توسط یک مسیر مستقل از پروتئین کیناز C.
بیان کننده مارکرهای	این رده سلولی انتروتوکسین پایدار حرارتی (Sta)، و فاکتور رشد اپیدرمی ایشیرشیا کلی(EGF) را بیان می کند.
ایزوآنزیمها:	G6PD، A
نظرات:	مواد مرجع تایید شده تحت یک فرآیند معتبر ISO 17034 تولید شده است. سلول ها با رنگ آمیزی ایمونوپروکسیداز برای کراتین مثبت هستند. سلول های HeLa حاوی توالی های ویروس پاپیلومای انسانی 18 (HPV-18) گزارش شده است. بیان P53 کم گزارش شد و سطوح نرمال (pRB سرکوبگر رتینوبلاستوما) یافت شد.

اطلاعات نگهداری

دستورالعمل باز کردن و ذخیره سازی

1- تمام ظروف را از نظر نشتی یا شکستگی بررسی کنید.

2- سلول های یخ زده را از بسته بندی یخ خشک خارج کرده و بلافاصله سلول ها را در دمای زیر 130- درجه سانتی گراد ترجیحاً در بخار نیتروژن مایع قرار دهید تا آماده استفاده شود.

محیط کامل

محیط پایه برای این رده سلولی DMEM High glucose

برای ساختن محیط رشد کامل، سرم جنین گاوی به غلظت نهایی 10%را به محیط پایه اضافه کنید.

درجه حرارت

37 درجه

شرایط نگهداری

برای اطمینان از بالاترین سطح زنده ماندن، ویال را ذوب کرده و در اسرع وقت پس از دریافت، کشت را آغاز کنید. اگر در بدو ورود، ادامه نگهداری کشت منجمد ضروری باشد، باید در فاز بخار نیتروژن مایع و نه در دمای 70- درجه سانتی گراد نگهداری شود. نگهداری در دمای 70- درجه سانتیگراد باعث از بین رفتن قابلیت زنده ماندن می شود.

1- ویال را با هم زدن ملایم در حمام آب 37 درجه سانتی گراد ذوب کنید. برای کاهش احتمال آلودگی، O-ring و کلاهک را خارج از آب نگهدارید. ذوب شدن باید سریع باشد (تقریباً 2 دقیقه).

2- به محض ذوب شدن محتویات، ویال را از حمام آب خارج کرده و با غوطه ور کردن یا پاشیدن با اتانول 70 درصد آن را ضدعفونی کنید. تمام عملیات از این نقطه به بعد باید در شرایط سخت اسپتیک انجام شود.

3- محتویات ویال را به یک فلاسک کشت بافت 75 سانتی متر مربعی منتقل کنید و با محیط کشت کامل توصیه شده رقیق کنید (اطلاعات دسته ای خاص را برای نسبت رقت توصیه شده ببینید). مهم است که از قلیایی بودن بیش از حد محیط در طول بازیابی سلول ها جلوگیری شود. پیشنهاد می شود، قبل از افزودن محتویات ویال، ظرف کشت حاوی محیط رشد حداقل به مدت 15 دقیقه در انکوباتور قرار داده شود تا محیط به pH طبیعی خود (7/0 تا 7/6) برسد.

4- کشت را در دمای 37 درجه سانتی گراد در انکوباتور مناسب انکوبه کنید. در صورت استفاده از محیطی که در این برگه محصول توضیح داده شده است، %5 CO₂ در جو هوا توصیه می شود.

اگر مایل هستید که عامل محافظ انجماد فوراً حذف شود یا سوسپانسیون سلولی غلیظ تری به دست آید، سوسپانسیون سلولی را در حدود g125 به مدت 5 تا 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید. مایع رویی را دور بریزید و سلول ها را با محیط رشد تازه با نسبت رقت توصیه شده در اطلاعات دسته خاص، مجدداً معلق کنید.

روش پاساژ دادن

حجم ها برای یک فلاسک 75 سانتی متر مربع داده شده است. مقدار محیط تفکیک مورد نیاز را متناسب با ظروف کشت با اندازه های دیگر افزایش یا کاهش دهید

1- محیط کشت را بردارید و دور بریزید.

2- به طور خلاصه لایه سلولی را با محلول 0/25% تریپسین و 0/53 میلی مولار EDTA شستشو دهید تا تمام آثار سرمی حاوی مهارکننده تریپسین پاک شود.

3- 2 تا 3 میلی لیتر محلول Trypsin-EDTA را به فلاسک اضافه کنید و سلول ها را زیر میکروسکوپ معکوس مشاهده کنید تا لایه سلولی پراکنده شود (معمولاً در عرض 5 تا 15 دقیقه).

توجه: برای جلوگیری از انباشته شدن، سلول ها را با ضربه زدن یا تکان دادن فلاسک تکان ندهید در حالی که منتظر جدا شدن سلول ها هستید. سلول هایی که به سختی جدا می شوند ممکن است در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار داده شوند تا پراکندگی آنها تسهیل شود.

4- 6 تا 8 میلی لیتر از محیط رشد کامل را اضافه کنید و سلول ها را با پیپت کردن به آرامی آسپیره کنید.

5- مقدار مناسبی از سوسپانسیون سلولی را به رگ های کشت جدید اضافه کنید.

6- کشت ها را در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه کنید.

نسبت پاساژ: 1:2 تا 1:6 توصیه می شود.

تعویض محیط: 2 تا 3 بار در هفته

مواد برای انجماد

95% محیط کامل + 5% v/v DMSO