اطلاعات عمومی
پروپیدیوم یدید چیست؟
پروپیدیوم یدید چیست؟
پروپیدیوم یدید (PI) یک عامل فلئورسنت است که می تواند برای رنگ آمیزی سلول ها و اسیدهای نوکلئیک استفاده شود. PI از طریق اتصال بین بازهای نوکلئیک اسید به DNA متصل می شود. هنگامی که این رنگ در یک محلول آبی است، حداکثر تهییج فلورسنت را در 493 نانومتر (آبی – سبز) و حداکثر انتشار را در 636 نانومتر (قرمز) دارد. پس از اتصال DNA، عملکرد کوانتومی PI، 20 الی 30 برابر افزایش می یابد و حداکثر تحریک / انتشار PI به 535 نانومتر (سبز) / 617 نانومتر (نارنجی – قرمز) منتقل می شود. پروپیدیوم یدید به عنوان یک رنگ برای DNA در فلوسیتومتری استفاده می شود که برای ارزیابی زنده ماندن سلول یا محتوای DNA در تجزیه و تحلیل چرخه سلولی و یا در تکنیک میکروسکوپی برای مشاهده هسته و سایر اندامک های حاوی DNA استفاده می شود. پروپیدیوم یدید قابلیت نفوذپذیری به غشا را ندارد، بنابراین این ویژگی می تواند در تمایز سلول های نکروزی، آپوپتوزی و سلول های سالم بر اساس یکپارچگی غشا مفید باشد. PI به RNA نیز متصل می شود و برای تمایز بین RNA و DNA رنگ آمیزی شده با آن، باید نهایتا با نوکلئازها مجاورت داده شود. PI به طور گسترده ای در رنگ آمیزی فلورسانس و مشاهده ی غشای سلول های گیاهی کاربرد دارد. از آنجا که پروپیدیوم یدید در سلول های زنده نفوذ نمی کند، از آن معمولاً برای تشخیص سلول های مرده در یک جمعیت سلولی استفاده می شود.
PI می تواند فقط از غشای باکتریایی آسیب دیده عبور کند به همین ترتیب می تواند به عنوان اندیکاتوری برای بررسی یکپارچگی غشا در نظر گرفته شود. این ماده می تواند DNA و RNA موجود در سلول های مرده یا آن هایی که غشای آسیب پذیر دارند وارد شود و آن ها را رنگ آمیزی کند. پروپیدیوم یدید ماده ای باردار است. یون پروپیدیوم با بار مثبت وارد سلول های زنده نمی شود بنابراین اگر هدف رنگ آمیزی تمام سلول ها باشد، باید قبل از رنگ آمیزی در اتانول تثبیت شوند.
برای تهیه محلول استوک از فرم جامد این ماده، مقدار 1 میلی گرم بر میلی لیتر (1.5 میلی مولار) از PI (MW = 668.4) را در آب دیونیزه (dH2O) حل کنید و در 4 درجه سانتیگراد به دور از نور نگهداری کنید. اگر شرایط نگهداری آن به درستی رعایت شود، محلول تهیه شده حداقل تا 6 ماه پایدار خواهد بود.
همچنین بخوانید…
خدمات کشت سلول آزمایشگاه ژنیران
سلام چه غلظتی از pI برای رنگ آمیزی سلول وچه زمانی برای مجاور کردن pl با سلول نیاز است
5 دقیقه در دمای محیط و غلظت 50 میکروگرم در هر میلی لیتر
سلام.برای تهیه محلول استوک پروپیدیوم ؛ باید در چقدر آب دیونیزه حل شود؟
با سلام
می توانید ۱ میلی گرم از این پودر را در ۱ میلی لیتر آب مقطر حل کنید