بررسی میزان آپوپتوز و نکروز | رنگ آمیزی AO/PI

آزمایشگاه ژنیران در راستای خدمت به دانشجویان، محققین و مراکز تحقیقاتی و پژوهشی، خدمات بررسی میزان آپوپتوز و نکروز در سلول های جانوری را به روش رنگ آمیزی فلوئوروسانت ارائه می کند. رنگ های مورد استفاده آکریدین نارنجی (acridine orange) و پروپیدیوم یدید (propidium iodide) از بهترین کیفیت و مارک های معتبر دنیا می باشد. سیستم کشت سلول های جانوری آزمایشگاه ژنیران با در برداشتن تجهیزات پیشرفته و امکانات به روز، بررسی آپوپتوز و نکروز را زیر نظر کادر مجرب و با تجربه به انجام می رساند. همچنین امکان استفاده از رنگ های دیگر فلوئورسنت برای به انجام رساندن بررسی های مختلف سلولی، در آزمایشگاه ژنیران امکان پذیر می باشد.

 

🔴 زمان تحویل:1 روز کاری

نحوه‌ی تحویل پروژه:

• نتایج تست به شکل عکس های مربوطه هر لام در فیلتر های سبز و آبی به شکل جدا و merge شده قابل ارائه است.

خدمات جانبی:

با توجه به امکانات آزمایشگاه ژنیران در زمینه کشت سلول، امکان انجام تست های مختلف در این زمینه امکان پذیر است. همچنین با توجه به امکانات مولکولی آزمایشگاه ژنیران امکان بررسی ژنومیک و پروتئومیک مسیر های آپوپتوتیک در سلول های جانوری امکان پذیر می باشد.

برای اطلاع از خدمات آزمایشگاه ژنیران در زمینه های مرتبط، روی هرکدام از موارد زیر کلیک کنید:

• سایر خدمات کشت سلول

• خدمات ژنتیک مولکولی

تجهیزات مربوط به خدمات تست بررسی آپوپتوز و نکروز:

در رابطه با بررسی میزان آپوپتوز و نکروز بیشتر بدانیم…

فرایند آپوپتوز یا همان مرگ برنامه ریزی شده سلولی، با شاخصه های مورفولوژیک و مکانیزم های بیوشیمیایی وابسته به انرژی شناخته می شود. آپوپتوز از رخدادهای حیاتی در بسیاری از فرآیند های سلولی، از قبیل تکوین و عملکرد سیستم ایمنی، آتروفی وابسته به هورمون، تکوین جنین، مرگ سلولی تحت القای موادشیمیایی، بیماری های عصبی، آسیب های ایسکمیک، ناهنجاری های خود ایمنی و سرطان است.

از آنجایی که مرگ یا زندگی سلول را می توان به راحتی دستکاری کرد، آپوپتوز پتانسیل درمانی مناسب را فراهم می کند. از این رو مطالعه ی ماشین چرخه ی سلولی و مسیر های انتقال پیام که توقف سیکل سلولی و آپوپتوز را کنترل می کنند برای شناخت هرچه بیشتر آپوپتوز ادامه دارد.

زمانی که سلولی دچار نکروز می شود نشان دهنده آسیب مستقیم سلولی می باشد که این مسیر یک مسیر نامناسب برای درمان بیماری ها و از بین بردن بافت های سرطانی می باشد. بهترین راه القاء مسیر آپوپتوتیک می باشد. روش های مختلفی برای سنجش میزان آپوپتوز و نکروز در سلول ها وجود دارد که یکی از روش های آن بررسی با نشر فلوئورسانت می باشد.

در این روش از رنگ آکریدین نارنجی (AO) و پروپیدیوم یدید (PI) استفاده می شود. رنگ آکریدین اورنج به DNA متصل شده و در 502 نانومتر بیشترین تهیج و بیشترین نشر را در 525 نانومتر از خود نشان می دهد. نشر آکریدین اورنج در فیلتر سبز صورت پذیرفته و سلول ها رنگ سبز از خود نشان می دهند. باید توجه داشت که آکریدین اورنج به DNA سلول های زنده و آپوپتوتیک متصل می شود.

لذا نشر رنگ سبز نشان دهنده زنده بودن سلول و یا آپوپتوز می باشد. رنگ پروپیدیوم یدید نیز به DNA و RNA متصل شده و این اتصال ارتباطی به توالی آن ندارد. این رنگ نیز به DNA سلول های نکروز یافته و یا آپوپتوتیک متصل شده و هیچ اینترکشنی با سلول های زنده ندارد. رنگ پروپیدیوم یدید در فیلتر آبی رنگ قرمز می گیرد و با ترکیب عکس های گرفته شده در فیلتر های آبی و سبز، می توان سلول ها را روی هم انداخت و آنالیز نتایج تست بررسی میزان آپوپتوز به شکل زیر می باشد:

سلول های زنده= رنگ سبز

سلول های نکروتیک= رنگ قرمز

سلول های آپوپتوتیک= رنگ نارنجی

باید توجه داشت که رنگ آمیزی AO/PI فقط یکی از روش های رنگ آمیزی فلوئورسنت می باشد. رنگ های فلوئورسنت دیگری برای رنگ آمیزی سلول ها به جهت بررسی های مختلف انجام می شود که در آزمایشگاه ژنیران قابل انجام می باشد.