مقدمه‌ای بر تست کومبس
تست کومبس به عنوان تست آنتی گلوبولین نیز شناخته می شود. از این تست کومبس برای سنجش آنتی بادی هایی که ممکن است به گلبول های قرمز خون بچسبند و باعث مرگ زودرس گلبول های قرمز خون شود ، استفاده می کنند. معرف كومبس، آنتی هیومن گلبولین یا AHG است. این ماده، با تزریق گلوبولین انسانی به حیواناتی تولید می شود که آنتی بادی های پلی کلونال خاصی را برای ایمونوگلوبولین های انسانی و فاکتورهای سیستم کمپلمان انسانی تولید می کنند.
اساس تست کومبس
سلول های قرمز خونی که سطح آن ها توسط اجزای سیستم کمپلمان و آنتی بادی های IgG پوشیده شده است، هنگام سانتریفیوژ مستقیماً آگلوتینه نمی شوند. در حقیقت این سلول ها توسط این اجزای کمپلمان و آنتی بادی ها حساس شده اند. برای اینکه آگلوتیناسیون اتفاق بیفتد ، یک آنتی بادی اضافی ، که با بخش Fc آنتی بادی IgG یا مولفه های کمپلمان C3b یا C3d واکنش می دهد ، باید به این مجموعه اضافه شود تا یک “پل” بین آنتی بادی ها یا کمپلمان موجود بر سطح سلول های قرمز ایجاد شود و باعث آگلوتیناسیون شود.
انواع تست کومبس
تست کومبس مستقیم
تست کومبس مستقیم برای تشخیص آنتی بادی هایی که به سطح گلبول های قرمز چسبیده اند استفاده می شود. بسیاری از بیماری ها و داروها می توانند باعث این امر شوند. این آنتی بادی ها گاهی گلبول های قرمز را از بین می برند و باعث کم خونی می شوند.
آزمایش کومبس معمولا روی نمونه خون نوزاد تازه متولد شده ای انجام می شود که در هنگام تولد به زردی مبتلا است. دو فرم متداول شناخته شده در این نوع همولیز که با واسطه آنتی بادی در بدن نوزادان صورت می گیرد عبارتند از، ناسازگاری Rh و ناسازگاری ABO.
روش تست کومبس مستقیم
- یک سوسپانسیون سلولی 5٪ در محلول نمکی سالین ایزوتونیک از گلبول های قرمز خونی تهیه کنید.
- با پیپت تمیز یک قطره از سوسپانسیون سلولی آماده شده را به یک لوله کوچک اضافه کنید.
- سلول ها را سه بار با نرمال سالین شست و شو دهید تا تمام آثار سرمی از بین برود.
- پس از آخرین شستشو کاملاً سالین آب گیری شود.
- دو قطره سرم AHG اضافه کنید.
- خوب مخلوط کرده و به مدت یک دقیقه در دور rpm1500 سانتریفیوژ کنید.
- سپس سلول ها را از نظر آگلوتیناسیون، به صورت ماکروسکوپی و میکروسکوپی بررسی کنید.
تست کومبس غیرمستقیم
تست غیر مستقیم کومبس به دنبال آنتی بادی هایی است که در خون بر علیه گلبول قرمز وجود دارد. این تست معمولاً برای تعیین اینکه آیا ممکن است بدن فرد به انتقال خون واکنش نشان دهد یا خیر ، انجام می شود.
تقریباً 5٪ بیماران به دلیل وجود آنتی بادی IgG ، آنتی بادی IgM یا هر دو ، تست کومبس غیرستقیم مثبت دارند.
روش انجام تست غیرمستقیم کومبس
- سه لوله آزمایش را به صورت T (سرم آزمایش) PC (کنترل مثبت) و NC (کنترل منفی) علامت گذاری کنید.
- در لوله ای با عنوان T (Test) ، 2 قطره سرم نمونه را اضافه کنید.
- در لوله آزمایش با برچسب PC (کنترل مثبت) ، 1 قطره سرم anti D بریزید.
- در لوله آزمایش با برچسب NC (کنترل منفی) ، 1 قطره نرمال سالین اضافه کنید.
- در هر لوله یک قطره سوسپانسیون سلولی 5 درصد از سلول های خونی O+ به هر لوله اضافه کنید.
- هر سه لوله را به مدت یک ساعت در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه کنید.
- سپس سلول ها را در نرمال سالین سه بار شست و شو می دهیم تا آنتی بادی های آزاد متصل نشده و آنتی بادی های غیر اختصاصی از محیط واکنش برود.
- دو قطره سرم Coombs (AHG) به هر لوله اضافه کنید.
- به مدت 5 دقیقه لوله ها را نگه دارید و سپس به مدت یک دقیقه در rpm1500 سانتریفیوژ کنید.
- پس از سانتریفیوژ سلول ها را معلق کرده و از نظر آگلوتیناسیون به صورت ماکروسکوپی و میکروسکوپی بررسی کنید.
تفسیر نتیجه تست کومبس
نتیجه منفی:
هیچ کلامپ سلولی و هیچ آگلوتیناسیونی در نمونه مشاهده نمی شود. این یعنی هیچ نوع آنتی بادی علیه گلبول های قرمز در سرم فرد وجود ندارد.
نتیجه مثبت:
آگلوتیناسیون سلول های خونی در طی یک آزمایش مستقیم کومبس به این معنی است که روی گلبول های قرمز خونی آنتی بادی دارد و ممکن است منجر به از بین رفتن گلبول های قرمز خون توسط سیستم ایمنی بدن (همولیز) شود.
- مطالعات بیشتر در بخش ویکی‌ژن
سلام. آیا برای کومبس مستقیم کنترل وجود دارد؟
بله، برای آزمایش کومبس مستقیم (Direct Coombs Test) کنترل وجود دارد.
🔹 کنترل مثبت:
معمولاً از گلبول‌های قرمز پوشش‌داده‌شده با IgG استفاده می‌شود که باید با معرف کومبس، آگلوتیناسیون دهند.
🔹 کنترل منفی:
از نمونه‌ای بدون آنتی‌بادی یا از سلول‌های نرمال بدون پوشش آنتی‌بادی استفاده می‌شود که نباید واکنش دهد.
📌 استفاده از کنترل‌ها برای اطمینان از صحت کیت و صحت اجرای تست ضروری است.
مادر گروه خونی o منفی . شب قبل ازمایش رگام زده. امکان مثبت شدن تست هست
بله، اگر مادر گروه خونی O منفی باشد و شب قبل از آزمایش، آمپول RhoGAM (روگام) تزریق کرده باشد، تست آنتی‌بادی غیرمستقیم (Indirect Coombs test) ممکن است مثبت شود.
صد انعقاد مصرفی در تست کومبس چیست؟
پلی‌اتیلن گلیکول (PEG) و آلبومین گاوی (BSA) به‌عنوان مواد صد انعقاد مصرفی در تست کومبس استفاده می‌شوند.
سلام 28 هفته هستم آزمایش کومبکس دادم نگاتیو بود الان آمپول روگام تزریق کنم یا نه؟
با پزشک خود مشورت کنید
تست کومبس با کدام گروه خونی اجرا میگردد
تست کومبس مستقیماً با گروه خونی خاصی اجرا نمی‌شود، بلکه به آنتی‌بادی‌های مرتبط با گلبول‌های قرمز بستگی دارد. با این حال، در شرایطی مانند ناسازگاری Rh یا ABO، گروه خونی می‌تواند در تفسیر نتایج تست اهمیت داشته باشد.
اگر این تست کومبس رازن باردار انجام ندهد ایا خطری برای اویا جنین رخ میدهد
اگر تست کومبس انجام نشود، در صورت وجود ناسازگاری خونی Rh، خطراتی برای جنین و بارداری‌های بعدی وجود دارد. برای جلوگیری از این مشکلات، انجام این آزمایش و تزریق روگام در صورت نیاز بسیار مهم است. توصیه می‌شود این موضوع را با پزشک متخصص زنان و زایمان خود مطرح کنید و تست‌های ضروری را انجام دهید.
سلام جواب آزمایش کومبس منفی باشد در۲۴هفته حاملگی چکار باید کرد
سلام، اگر آزمایش کومبس غیرمستقیم در هفته ۲۴ بارداری منفی باشد، به این معنی است که هنوز هیچ آنتی‌بادی علیه گلبول‌های قرمز جنین در بدن مادر وجود ندارد. در این شرایط معمولاً اقدامات زیر انجام می‌شود:
1. تزریق ایمونوگلوبولین RH (RhoGAM یا مشابه آن)
اگر مادر Rh منفی و جنین احتمالا Rh مثبت باشد، باید در هفته ۲۸ بارداری یک دوز ایمونوگلوبولین RH دریافت کند. این تزریق از تولید آنتی‌بادی‌های ضد Rh در صورت تماس خون مادر با خون جنین جلوگیری می‌کند.
اگر زایمان طبیعی، سقط جنین، یا هر نوع خونریزی در دوران بارداری رخ دهد، ممکن است دوز اضافه‌ای از ایمونوگلوبولین مورد نیاز باشد.
2. تکرار آزمایش کومبس
پزشک ممکن است آزمایش کومبس را در طول بارداری یا پس از زایمان تکرار کند تا مطمئن شود که هیچ آنتی‌بادی تولید نشده است.
3. پیگیری‌های منظم بارداری
پزشک شما ممکن است سونوگرافی‌ها و آزمایش‌های اضافی برای بررسی سلامت جنین و اطمینان از عدم بروز مشکلات ناشی از ناسازگاری Rh انجام دهد.
4. پس از زایمان
اگر نوزاد Rh مثبت باشد، مادر ممکن است یک دوز دیگر ایمونوگلوبولین RH دریافت کند تا از بروز مشکلات در بارداری‌های بعدی جلوگیری شود.