ابزار و وسایل آزمایشگاهی شامل، محلول ها کیت ها, ویکی ژن
رنگ رایت: تهیه، اصول، روش اجرا و نتایج
رنگ رایت چیست؟ رنگ‌آمیزی رایت
رنگ‌آمیزی رایت نوعی رنگ‌آمیزی رومانوفسکی است که به طور معمول در آزمایشگاه‌های هماتولوژی برای رنگ‌آمیزی معمول اسمیر خون محیطی استفاده می‌شود. همچنین برای رنگ‌آمیزی آسپیراسیون مغز استخوان، نمونه‌های ادرار و مشاهده انگل‌های مالاریا در اسمیر خون به کار می‌رود.
رنگ‌آمیزی رایت به نام جیمز هومر رایت نامگذاری شده است که در سال ۱۹۰۲ بر اساس اصلاحی بر رنگ‌آمیزی رومانوفسکی آن را ابداع کرد. این رنگ‌آمیزی به راحتی بین سلول‌های خونی تمایز قائل می‌شود و از این رو برای انجام شمارش افتراقی گلبول‌های سفید خون (WBC) و ارزیابی مورفولوژی سلول‌های خونی به طور گسترده مورد استفاده قرار می‌گیرد.
رنگ‌آمیزی رایت یک رنگ‌آمیزی چند رنگ است که از مخلوطی از ائوزین و متیلن آبی تشکیل شده است. از آنجایی که رنگ‌آمیزی رایت بر پایه متانول است، نیازی به مرحله تثبیت قبل از رنگ‌آمیزی ندارد. با این حال، تثبیت به کاهش مصنوعات ناشی از رطوبت که ممکن است در روزهای مرطوب یا با رنگ‌آمیزی قدیمی رخ دهد، کمک می‌کند.
متانول سلول‌ها را به لام فیکس می‌کند. ائوزین Y یک رنگ اسیدی آنیونی و متیلن آبی یک رنگ بازی کاتیونی است. هنگام رقیق شدن در آب بافر، یونیزاسیون رخ می‌دهد. ائوزین اجزای بازی مانند هموگلوبین و گرانول‌های ائوزینوفیلی را به رنگ نارنجی تا صورتی رنگ می‌کند. متیلن آبی اجزای سلولی اسیدی مانند اسید نوکلئیک و گرانول‌های بازوفیلی را در سایه‌های مختلف آبی رنگ می‌کند. اجزای خنثی سلول‌ها توسط هر دو جزء رنگ آمیزی می‌شوند و رنگ‌های متغیری ایجاد می‌کنند.
معرف ها
رنگ ممکن است به صورت پودری خریداری شود و سپس با متانول مخلوط شده و یا اینکه از ابتدا به شکل یک محلول آماده خریداری شود.
** محلول رنگ‌آمیزی **
- پودر رنگ‌آمیزی رایت = ۱ گرم
- متانول بدون آب = ۴۰۰ میلی‌لیتر
- بافر فسفات (۰.۱۵ مولار، ph 6.5/6.8)
- پتاسیم دی‌هیدروژن فسفات، بدون آب = ۰.۶۶۳ گرم
- دی‌سدیم هیدروژن فسفات، بدون آب = ۰.۲۵۶ گرم
- آب مقطر = ۱۰۰ میلی‌لیتر
روند اجرا
- یک لایه نازک از خون یا مغز استخوان روی لام میکروسکوپی تهیه کنید و بگذارید در هوا خشک شود
- گستره (اسمیر) خشک شده در هوا را روی راک رنگ‌آمیزی لام قرار دهید، به گونه‌ای که سمت اسمیر به سمت بالا باشد
- فیلم خون را با محلول رنگ‌آمیزی رقیق نشده بپوشانید. رنگ رقیق نشده، گستره را تثبیت می‌کند و تا حدی رنگ می‌کند
- به مدت ۲-۳ دقیقه بگذارید بماند. ۵
- تقریباً مقدار مساوی آب بافر شده (pH 6.5) اضافه کنید (به آرامی مخلوط کنید تا درخشش فلزی ایجاد شود). رنگ رقیق شده نباید سرریز کند. ۶
- به مدت ۵ دقیقه بگذارید بماند
- بدون اینکه لام را تکان دهید، آن را با آب مقطر بشویید تا قسمت‌های نازک‌تر گستره به رنگ صورتی مایل به قرمز درآیند
- اجازه دهید لام در دمای اتاق خشک شود و زیر میکروسکوپ بررسی کنید.
| سلول |
نتیجه |
| Erythrocytes | تاحدودی زرد- قرمز |
| Neutrophils | Nucleus: بنفش تیره Granules: گرانول‌های قرمز مایل به یاسی Cytoplasm: صورتی کم رنگ |
| Eosinophils | Nucleus: آبی Granules: قرمز تا نارنجی قرمز Cytoplasm: آبی |
| Basophils | Nucleus: بنفش تا آبی تیره Granules: آبی تیره |
| Lymphocytes | Nucleus: بنفش تیره Cytoplasm: آبی آسمانی |
| Monocytes | Nucleus: بنفش تیره Cytoplasm: صورتی و آبی با توزیع نامنظم(موزاییکی) |
| Platelets | گرانول‌های بنفش تا بنفش تیره |
همچنین بخوانید:
- رنگ های رومانوفسکی: اصول، انواع، کاربردها
- انواع رنگ‌آمیزی مورد استفاده در میکروبیولوژی
- رنگ آمیزی سابین-فلدمن (Sabin-Feldman dye test): اصول و محدودیتها
- رنگ آمیزی تریکروم ویتلی (Wheatley Trichrome Staining): تعریف، اصول، روش و تفسیر نتایج
- رنگ آمیزی آیرون هماتوکسیلین (Iron-Hematoxylin Staining): اصول، روش، کاربرد و نتایج
مترجم: محمد صادق محمودی لرد
جهت خرید و یا استعلام قیمت با ما تماس بگیرید یا در واتسپ پیام بزارید
سلام
ترکیب بافر برای رنگ آمیزی رایت چه موادی هستند؟
مواد لازم برای ساخت بافر رایت:
فسفات سدیم دی‌بازیک (Dibasic Sodium Phosphate): Na₂HPO₄، به عنوان یکی از مولفه‌های اصلی در تهیه بافر فسفاتی استفاده می‌شود.
فسفات سدیم مونوبازیک (Monobasic Sodium Phosphate): NaH₂PO₄، مورد استفاده برای تنظیم دقیق pH بافر.
سلام پودر رایت تهیه کردم نحوه اماده سازیشو بهم لطف میکنین بگین ممنون میشم لطفا ایمیل کنین یا اس ام اس بدین با تشکر
niloofarkianfar70@gmail.com
سلام دوست عزیز،
مواد و روش ها
راه حل لکه رایت. پودر را ترکیب کنید
لکه رایت ، 3 گرم ؛ لکه پودر Giemsa ،
.33 گرم ؛ گلیسیرین (شرکت مالینکرودت ، پاریس ، کالیفرنیا) ،
30 میلی لیتر و متیل غیر آب پوشیده (مطلق)
الکل (Mallinckrodt Inc. ، Paris ، KY) ، 970 میلی لیتر.
مواد را در یک بطری قهوه ای به حداقل مدت 30 مخلوط کنید.
و سپس در انکوباتور خشک 37 درجه سانتیگراد انکوبه کنید.
بطری باید دو بار در روز به مدت سه روز کاملاً تکان داده شود.
سپس رنگ برای استفاده آماده است و بطری باید در دمای اتاق نگه داری شود. قبل از استفاده ، باید
از طریق کاغذ فیلتر Whatman فیلتر شده و در یک بطری رها شود.
جهت مطالعه بیشتر کلیک کنید.