ابزار و وسایل آزمایشگاهی شامل، محلول ها کیت ها
مرکاپتواتانول چیست؟
مرکاپتواتانول
2-مرکاپتواتانول (با نام β-مرکاپتواتانول نیز شناخته می شود، BME, 2BME, 2-ME or β-met) یک ترکیب شیمیایی با فرمولاسیون HOCH2CH2SH است. این ماده با نام ME یا βME نیز شناخته می شود، برای کاهش پیوندهای دی سولفیدی استفاده می شود و می تواند به عنوان یک آنتی اکسیدان بیولوژیکی، رادیکال های هیدروکسیل را مهار کند. این ماده بوی نا مطبوعی دارد ولی نسبت به سایر تیول ها قابل تحمل تر است.
ساخت 2ME
2-مرکاپتواتانول به طور صنعتی از واکنش اتیلن اکسید با سولفید هیدروژن به دست می آید. تیودیگلیکول و زئولیت های مختلف، این واکنش را کاتالیز می کنند.
کاربردی
کاهش پروتئین ها
برخی از پروتئین ها را می توان با 2-مرکاپتواتانول دناتوره کرد، این ماده پیوندهای دی سولفید را که بین گروه های تیول در رزیدو های سیستئین تشکیل می شود، جدا می کند. اگر در محیط 2-مرکاپتواتانول اضافی وجود داشته باشد، تعادل زیر به سمت راست منتقل می شود:
RS–SR + 2 HOCH2CH2SH ⇌ 2 RSH + HOCH2CH2S–SCH2CH2OH
با شکستن پیوندهای S-S، ساختار سوم و ساختار چهارم برخی پروتئین ها مختل می شود. به دلیل توانایی این ماده در ایجاد اختلال در ساختار پروتئین ها، از آن برای تجزیه و تحلیل پروتئین ها استفاده می شود، به عنوان مثال، برای اینکه اطمینان حاصل کنیم که محلول پروتئینی مورد نظر ما به جای اتصالات دی سولفیدی یا دیگر اولیگومر ها، حاوی مولکول های مونومری پروتئین است از این ماده استفاده می کنیم. از آنجا که 2-مرکاپتواتانول ترکیبات اضافی با سیستئین های آزاد ایجاد می کند و تا حدی سمی تر است، معمولا بیشتر از دیتیوتریتول (DTT) استفاده می شود خصوصا در SDS-PAGE. DTT یک عامل کاهنده قوی تری نسبت به 2ME است که پتانسیل اکسایش آن (در pH 7). 0.33 − ولت است، در حالی که این مقدار برای 2-مرکاپتواتانول 0.26 – ولت است.
2-مرکاپتواتانول غالباً به جای دیتیوتریتول (DTT) یا تریس (2-کربوکسی اتیل) فسفین (TCEP) بدون بو استفاده می شود.
اگرچه 2-مرکاپتواتانول از نوسانات بالاتری نسبت به DTT برخوردار است، اما پایداری آن بیشتر است: نیمه عمر 2-مرکاپتواتانول بیش از 100 ساعت در pH 6.5 و 4 ساعت در pH 8.5 است در حالی که نیمه عمر DTT در pH 6.5 40 ساعت و درpH 8.5 به مدت 1.5ساعت است.
جلوگیری از اکسیداسیون پروتئین
2 مرکاپتواتانول و عوامل کاهنده دیگر نظیر DTT اغلب به واکنش های آنزیمی اضافه می شوند تا اکسیداسیون جایگاه های آزاد سولفیدریل را مهار کنند. از این رو فعالیت پروتئین را حفظ می کنند. این ماده اغلب در سنجش های آنزیمی به عنوان یک جز بافر استاندارد استفاده می شود.
دناتوراسیون ریبونوکلئازها
2 مرکاپتواتانول در برخی از روش های جداسازی RNA برای از بین بردن ریبونوکلئاز آزاد شده در طی لیز سلول استفاده می شود. پیوندهای دی سولفید زیاد موجود در ریبونوکلئازها، آن هارا به آنزیم های بسیار پایداری تبدیل کرده است، بنابراین از 2-مرکاپتواتانول برای کاهش این پیوندهای دی سولفیدی استفاده می شود که نهایتا ساختار پروتئین را به طور غیرقابل برگشتی دناتوره می کند. این کار از هضم آنزیمی RNA در طی مراحل استخراج آن جلوگیری می کند.
نکات ایمنی
2 مرکاپتواتانول ماده ای سمی در نظر گرفته می شود، که باعث تحریک مجاری بینی و مجاری تنفسی هنگام استنشاق شده، همچنین سبب تحریک پوست، استفراغ و درد معده از طریق بلع می شود. در صورت مواجهه شدید با این ماده، می تواند حتی منجر به مرگ شود.
جهت خرید و یا استعلام قیمت با ما تماس بگیرید یا در واتسپ پیام بزارید
سلام برای آزمایش 2MEاین محلول را به چه نسبتی باید حل کرد باسپاس
برای آزمایش 2ME، محلول 2-Mercaptoethanol باید به نسبت 0.1 مولار آماده شود. این محلول برای تخریب آنتی‌بادی‌های IgM در سرم بیماران استفاده می‌شود و کمک می‌کند تا آنتی‌بادی‌های IgG از آنتی‌بادی‌های IgM افتراق داده شوند.
آیا تنفس و تماس با این ترکیب خطر دارد؟
قبل از استفاده از هرگونه ماده شیمیایی شما بایستی msds) material safety date sheet ) رو مطالعه بفرمایید و سپس اقدام به استفاده از آن نمایید .
مرکاپتواتانول یک ترکیب سمی در نظر گرفته می شود و باعث ایجاد تحریک در مجاری بینی و مجاری تنفسی هنگام استنشاق، تحریک پوست، استفراغ و درد معده از طریق بلع و در صورت مواجهه شدید منجر به مرگ می شود.
بنابراین در حین استفاده از این ماده بایستی تمامی موارد ایمنی رعایت شود.
آیا تنفس بتا مرکاپتواتانول خطرناک است؟
سلام با توجه به متن و در صورت تکرر برخورد با این ماده بله اما با یکبار برخورد با این ماده خیر : مرکاپتواتانول ماده ای سمی در نظر گرفته می شود، که باعث تحریک مجاری بینی و مجاری تنفسی هنگام استنشاق شده، همچنین سبب تحریک پوست، استفراغ و درد معده از طریق بلع می شود. در صورت مواجهه شدید با این ماده، می تواند حتی منجر به مرگ شود.