محیط کشت HAT چیست؟

محیط کشت HAT چیست؟

HAT Medium (محیط هیپوکسانتین-آمینوپترین-تیمیدین) یک محیط انتخابی برای کشت سلولی سلول های پستانداران است که بر پایه ترکیب آمینوپرتین است. این ماده دارویی است که با مهار دی هیدروفولات ردوکتاز به عنوان یک مهار کننده متابولیسم فولات است که این عمل را به کمک هیپوزانتین (مشتق پورین) و تیمیدین (یک دی اکسینوکلئوزید) انجام میدهد که واسطه هایی در سنتز DNA هستند. این ماده (آمینوپترین) سنتز DNA de novo را مسدود می کند، که برای ادامه تقسیم سلول کاملاً لازم است، اما هیپوزانتین و تیمیدین مواد اولیه را برای جلوگیری از انسداد به سلول ها عرضه می کند.

آنزیم دی هیدروفولات ردوکتاز، که با کاهش دی هیدروفولات، تتراهیدروفولات (THF) تولید می کند، بطور خاص توسط آمینوپترین مسدود می شود. THF، در ارتباط با پروتئین های خاص، می تواند واحدهای کربنی منفرد دریافت کند که سپس به مناطق هدف خاص منتقل می شوند.

یکی از اهداف مهم برای تولیدمثل سلولی تیمیدیلات سنتاز است که از دیوکسیوریدین مونوفسفات (dUMP)، تیمیدین مونوفسفات (TMP) ایجاد می کند. با واکنش های اضافی فسفوریلاسیون، می توان از TMP برای ساخت تیمیدین تری فسفات (TTP)، یكی از چهار پیش ساز نوكلئوتیدی استفاده كرد كه توسط DNA پلیمرازها برای سنتز DNA استفاده می شود. بدون THF مورد نیاز برای تبدیل dUMP، هیچ TTP وجود ندارد و سنتز DNA نمی تواند ادامه یابد، مگر اینکه TMP از منبع دیگری تولید شود. منبع جایگزین تیمیدین موجود در محیط HAT است که می تواند توسط سلول ها جذب شده و توسط تیمیدین کیناز (TK) به TMP فسفریله شود.

سنتز IMP، (پیش ساز  GMP و GTP و AMP و ATP ) نیز به THF نیاز دارد. در این حالت هیپوزانتین-گوانین فسفریبوزیل ترانسفراز (HGPRT) به هیپوزانتین جذب شده از محیط با PRPP واکنش می دهد و پیرو فسفات را آزاد می كند تا IMP را از یك مسیرsalvage  تولید كند.

جهت خرید و یا استعلام قیمت با ما تماس بگیرید یا در واتسپ پیام بزارید

02186073470

مطالعات بیشتر در بخش راهنمای علمی سایت