مالاشیت گرین یک ترکیب آلی است که به عنوان یک ماده رنگی و ضد میکروبی در پرورش آبزیان استفاده می شود. از رنگ مالاشیت به طور سنتی به عنوان نوعی رنگ برای موادی مانند ابریشم، چرم و کاغذ نیز استفاده می شود. این رنگ با وجود نامی که دارد، از ماده معدنی مالاشیت تهیه نشده است و این نام فقط از شباهت رنگی با آن گرفته شده است.
از روش رنگ آمیزی افتراقی Schaeffer-Fulton برای تمایز بین سلول های رویشی و اندوسپورها استفاده می شود. برای رنگ گیری اندوسپورها از یک رنگ اولیه (سبز مالاشیت) استفاده می شود. از آنجا که اندوسپورها در برابر رنگ آمیزی مقاومت می کنند، با افزایش حرارت، سبز مالاشیت به دیواره اسپور نفوذ می کند. در این تکنیک، گرمایش به عنوان دندانه یا شانه رنگ عمل می کند.
در این متد رنگ آمیزی اسپور، نیازی به استفاده از هیچ نوع رنگ بری نیست زیرا رنگ مالاشیت گرین به شکل نسبتاً ضعیفی به دیواره سلول و دیواره اسپور متصل می شود. در حقیقت، اگر رنگ با آب خوب شسته شود، رنگ از دیواره سلول خارج می شود به همین دلیل از آب برای رنگ زدایی استفاده می شود.
نکته حائز اهمیت این است که در Gram Staining و AFB Staining از الكل یا اسید الكل یا اسید بعنوان ماده رنگ بر استفاده می شود اما در رنگ آمیزی اسپور، تنها آب كافی است. زیرا:
- رنگ سبز مالاشیت در آب محلول است و نیز اتصال محکمی به دیواره سلول ندارد.
- سلول های رویشی نیز در اثر گرما مختل شده اند به همین دلیل، سبز مالاشیت به راحتی از آن ها شستشو داده شود.
از آنجا که اندوسپورها در برابر رنگ آمیزی مقاوم هستند به همان اندازه در برابر رنگ زدایی نیز مقاوم هستند و رنگ اولیه را حفظ می کنند در حالی که سلول های رویشی رنگ را از دست می دهند. به همین دلیل برای رنگ آمیزی سلول های رویشی بی رنگ، از یک ضد رنگ یا رنگ ثانویه (safranin) استفاده می شود.
وقتی سلول ها زیر میکروسکوپ مشاهده می شوند، دارای سه ویژگی هستند:
- سلول های رویشی (سلول باکتری) صورتی / قرمز (رنگ ثانویه) قابل مشاهده هستند.
- سلول های رویشی (سلول باکتری) حاوی اندوسپورها باید صورتی رنگ شوند و هاگ یا اندوسپور باید به صورت بیضوی سبز درون سلول ها دیده شود.
- اندوسپورهای بالغ و آزاد نیز نباید با باکتری های رویشی در ارتباط باشند و باید به صورت بیضوی سبز دیده شوند.
جهت خرید و یا استعلام قیمت با ما تماس بگیرید یا در واتسپ پیام بزارید
