بافر TBS چیست؟ چگونه تریس بافر سالین (TBS) تهیه کنیم؟

فهرست مطالب نمایش

نحوه تهیه تریس بافر سالین (TBS)

بافر TBS برای زیست شناسی مولکولی مناسب است. زیرا ایزوتونیک بوده و برای سلول‌ها غیر سمی است. این بافر اغلب به عنوان یک بافر شستشو یا به عنوان یک ماده رقیق کننده در ایمونواسی استفاده می‌شود. در شناسایی ایمونوهیستوشیمی زمانی که بک‌گراند غلیظ است و همچنین برای رقیق کردن آنتی بادی‌های آلکالن فسفاتاز یا کونژوگه با پراکسیداز در وسترن بلات استفاده می‌شود.

تریس بافر سالین (TBS) بافری است که در چندین روش بیوشیمیایی برای حفظ pH در محدوده تعریف شده استفاده می‌شود. Tris دارای قابلیت بافر قلیایی خفیف در محدوده 7-9.2 (با HCl) است. در دمای 25 درجه سانتیگراد، اسید مزدوج تریس دارای pKa 8.07 است. PKa با هر درجه سانتیگراد افزایش دما حدود 0.03 واحد کاهش می‌یابد. هنگامی که دمای محلول تغییر می‌کند، pH ممکن است به طور قابل توجهی تغییر کند.

کاربردهای تریس بافر سالین (TBS)

به عنوان رقیق کننده آنتی بادی در وسترن بلات استفاده می‌شود.
به عنوان بافر شستشو در ایمونواسی استفاده می‌شود.
در رنگ آمیزی ایمونوهیستوشیمیایی استفاده می‌شود.
برای رقیق کننده نمونه در تشخیص آزمایشگاهی استفاده می‌شود.
در هیبریداسیون درجا استفاده می‌شود.

دستور تهیه تریس بافر سالین 0.1 M

معرف‌های مورد نیاز

غلظت مواد تشکیل دهنده

تریس (mw: 121.14 گرم بر مول) 12.1 گرم 0.09988 M
کلرید سدیم (NaCl) (mw: 58.44 g/mol) 8 g 0.1368 M
کلرید پتاسیم (mw: 74.55 گرم بر مول) 0.2 گرم 0.002682 M
روش تهیه تریس بافر سالین (TBS) 0.1 M
800 میلی لیتر آب مقطر باید در یک ظرف مناسب آماده شود.
به مخلوط، 8 گرم کلرید سدیم اضافه کنید.
0.2 گرم کلرید پتاسیم باید به مخلوط اضافه شود.
12.1 گرم تریس را داخل مخلوط بریزید.
HCl pH را روی 7.4 تنظیم کنید.
1 لیتر آب مقطر اضافه کنید.

دستور العمل برای تولید 10x استوک بافر TBS

معرف‌های مورد نیاز

غلظت مواد تشکیل دهنده

تریس (mw: 121.14 گرم بر مول) 24 گرم –
کلرید سدیم (mw: 58.44 گرم بر مول) 88 گرم –
رویه تولید 10X بافر سالین تریس استوک (TBS)
برای تهیه 1 لیتر محلول استوک، ۲۴ گرم تریس و 88 گرم NaCl را در 900 میلی لیتر آب مقطر حل کنید.
ثانیاً pH محلول را با کمک HCl روی 7.6 تنظیم کنید.
حجم نهایی را با استفاده از آب مقطر به 1 لیتر تنظیم کنید.

جهت خرید و یا استعلام قیمت با ما تماس بگیرید یا در واتسپ پیام بزارید

02186073470

همچنین بخوانید: