خدمات استخراج DNA

آزمایشگاه ژنیران با هدف خدمت به محققین و دانشجویان و همچنین کمک به سایر مراکز آماده ارائه خدمات در زمینه استخراج DNA از انواع بافت های مربوط به موجودات پرسلولی و میکروارگانیسم ها می باشد. خدمات استخراج DNA با قیمت دانشجویی و بیشترین دقت و کمترین زمان خواهد بود.

استخراج DNA با استفاده از روش های فنول-کلروفرم، salting out و یا با استفاده از کیت های تجاری از برند های معتبر قابل انجام است. استخراج DNA در آزمایشگاه ژنیران با به کارگیری مواد درجه یک، دستگاه های پیشرفته در زمینه سانتریفوژ و نانودراپ و با بهره گیری از تیم مجرب و با سابقه در کوتاه ترین زمان با بیشترین دقت آماده خدمت رسانی می باشد.

ضمناً نتایج آنالیز های کیفی (الکتروفورز DNA) و کمی (تعیین غلظت DNA) نمونه های DNA استخراج شده نیز، ارائه می شود

استخراج اسید های نوکلئیک به عنوان اولین مرحله در تحقیقات و بررسی های ژنتیکی به منظور مطالعه علت ژنتیکی بیماری ها، تعیین توالی ژنوم و تشخیص باکتری ها و ویروس ها و انجام آزمایشات پدر-مادری و علم پزشکی قانونی از اهمیت اساسی برخوردار است.

🔴 زمان تحویل: یک روز کاری 🔴 نحوه محاسبه قیمت:

نحوه‌ی تحویل پروژه:

تحویل DNA استخراج شده در ژل و یا به شکل محلول به همراه غلظت آن تمام DNA های استخراج شده تحت آنالیز با دستگاه اسپکتروفوتومتری «تعیین غلظت با اسپکتروفوتومتری» قرار می‌گیرند و در صورتی که کیفیت و کمیت لازم را نداشته باشند، DNA مجددا استخراج می‌شود.در صورت درخواست، برای حصول اطمینان بیشتر از سلامت DNA، آزمایش الکتروفورز نیز انجام می‌شود.

خدمات جانبی:

آزمایشگاه ژنیران در حال حاضر با دارا بودن تجهیزات در زمینه های مختلف زیست شناسی سلولی-مولکولی و همچنین بخش حیوانات آزمایشگاهی علاوه بر خدمات استخراج DNA، خدمات مربوط به سایر بخش هارا نیز ارائه می کند.

دانشجویان و پژوهشگران محترم می توانند پروژه خود را از سطوح in-vivo و in-vitro در آزمایشگاه ژنیران شروع کرده و DNA را از نمونه های خود استخراج کنند. همچنین پس از استخراج می توانند برای اهداف دیگر همچون PCR، الکتروفورز و … پروژه خود را در آزمایشگاه ژنیران پیش ببرند.

برای کسب اطلاعات بیشتر از خدمات هریک از بخش های زیر، کلیک کنید:

• خدمات کشت سلول های جانوری

• خدمات حیوانات آزمایشگاهی

• خدمات ژنتیک مولکولی

• خدمات میکروبیولوژی

در رابطه با استخراج DNA بیشتر بدانیم:

اهمیت وجود DNA برای یک ژنتیک دان را می توان با  اهمیت وجود بوم برای یک نقاش  همانند دانست. همانطور که اگر بومی برای نقاشی وجود نداشته باشد دیگر هیچ زمینه ای برای ترکیب رنگ های متنوع و خلق آثار هنری وجود نخواهد داشت به همین ترتیب اگر DNA ای هم نباشد همه تکنیک ها و روش ها در آزمایشگاه ژنتیک بی معنی خواهد بود.

برای استخراج  DNA روش های مختلفی وجود دارد که در ادامه به 3 تا از پرکاربرد ترین روش ها برای استخراج DNA  اشاره خواهیم کرد . هر سه این روش ها بسیار کاربردی هستند و بنا بر نیاز هر پروژه می‌توان روش مورد نیاز را انتخاب کرد .برای مثال استخراج DNA به روش فنول-کلروفرم و Salting-out  نسبت به روش کیت غلظت های بالاتری از DNA را به ما می‌دهند.

اما امکان آلودگی و کاهش درصد خلوص آن بالاتر است و در ضمن زمان بیشتری هم طول می‌کشد اما روش کیت بسیار سریع است و با اینکه غلظت پایین تری به ما می‌دهد اما درصد خلوص بالایی دارد .در نتیجه است بهتر است با توجه به هدف نهایی خود روش استخراج را انتخاب کنیم.در زیر هر یک از این روش ها را به اختصار توضیح می‌دهیم.

در استخراج DNA  از خون به روش salting-out ابتدا گلبول های قرمزخون را به کمک lysis buffer های مخصوص لیز کرده و سانتریفوژ انجام می‌دهند. رسوب گلبول های سفید را نیز با استفاده از محلول lysis buffer که حاوی دترجنت های غیر یونی است به همراه پروتئیناز K  تحت گرمای انکوباتور حل می کنند تا محتویات ژنتیکی سلولها آزاد گردد.

سپس به کمک نمک NaCl  غلیظ (6 مولار) DNAرا از سایر اجزای سلولی به کمک سانتریفوژ طی دو مرحله جدا ساخته در نهایت به وسیله الکل ایزوپروپانول DNA را از فاز آبی خارج کرده و با الکل اتانول 70 درصد دو بار شست و شو می دهند. در روش فنول کلروفرم بعد از لیز گلبول های سفید به کمک بافر لایز از فنول به منظور جداسازی اسید نوکلئیک و دناتوره کردن پروتئین ها استفاده می شود.

برای تکمیل این فرآیند در مرحله بعد کلروفرم اضافه شده و در نهایت با الکل ایزوپروپانول DNA را رسوب می دهند. در روش های استخراج به وسیله کیت نیز مواد مورد نیاز داخل جعبه کیت قرارداده شده و امکانات و تجهیزات دستگاهی برای اجرای پروتکل داخل کیت در آزمایشگاه ژنیران مهیا می باشد.

DNA استخراج شده حاصل از هرکدام از روش ها در نهایت به کمک حلال های مناسب همچون بافر Tris-EDTA و Elution buffer های مناسب به وسیله دستگاه dry-block حل شده و برای سنجش کیفیت وکمیت به وسیله دستگاه الکتروفورز و اسپکتروفتومتر آماده می شود. با استفاده از هرکدام از روش های ذکر شده در نهایت DNA مطلوب حاصل می شود که می‌توان از آن برای اهداف مورد نظر مانند PCR  بهره برد.

باید توجه داشت مشخصاً در استخراج ( انواع استخراج   DNAکه در بالا ذکر شد ) نمونه ها باید ارزیابی شوند. اگر هدف تعیین غلظت کمی DNA باشد می توان از روش تعیین غلظت با اسپکتروفوتومتری استفاده نمود. در تعیین غلظت با اسپکتروفوتومتری پس از تمام شدن استخراج، مولکول DNA به عنوان یک کروموفور در نظر گرفته می شود که در طول موج 260 نانومتر جذب دارد و با تابش طول موج در همین محدوده و بررسی جذب DNA استخراج شده، غلظت آن حاصل می شود.

تعیین غلظت با اسپکتروفوتومتری در انواع روش های استخراج DNA کاربرد داشته و باید توجه داشت در انواع استخراج از چه فاکتورهایی استفاده می شود. عموماً در روش های مختلف استخراج دو نوع آلودگی مطرح است: این آلودگی ها ممکن است از نوع پروتئینی و یا مواد آلی باشد.زمانی که DNA استخراج شده با روش اسپکتروفوتومتری تعیین غلظت می شود، می توان جذب DNA استخراج شده را در محدوده طول موج های مربوط به آلودگی ها بررسی کرد و اگر در آن محدوده ها نمونه جذب داشت نشان دهنده وجود آلودگی می باشد.

لذا استخراج و تخلیص صحیح DNA بسیار مهم است چرا که آلودگی های مختلف احتمالی در انواع استخراج وجود دارندو باید همیشه روش هایی که کمترین احتمال آلودگی را دارند انتخاب شوند تا باکیفیت ترین DNA ممکن را داشت باشیم.

آزمایشگاه ژنیران کارآمدترین متد ها را در انواع استخراج از انواع نمونه ها به کار گرفته است و همه اسید های نوکلئیک استخراج شده را با روش اسپکتروفوتومتری تعیین غلظت می‌نمایدو در صورت نیاز اسید نوکلئیک استخراج شده را الکتروفورز می کند و در صورتی که نتایج مطلوب حاصل شد، نمونه تحویل داده می شود

🔵کاربرد های DNA در تحقیقات و پزشکی🔵

✔انواع PCR: آزمایشگاه ژنیران با دارا بودن تجهیزات لازم جهت انجام انواع PCR می‌تواند پس از به پایان رسیدن فرایند استخراج، دانشجویان عزیز  را در راستای انجام PCR مورد نظرشان یاری کند.

 ✔روش های تعیین توالی: توالی یابی DNA یعنی با تعیین توالی یک قطعه از DNA ، از ترتیب قرارگرفتن چهار باز نوکلئوتیدی آدنین، گوانین، سیتوزین و تیمین در آن مولکول اطلاع پیدا کنیم.امروزه تعیین توالی DNA به روش های مختلفی انجام می‌شود که بخصوص برا تشخیص بیماری های نادر ژنتیکی در انسان بسیار پرکاربرد است.

تعیین توالی DNA  این امکان را فراهم می‌کند که با مقایسه DNA بین اندام های مختلف ، ارتباطات بین اندامها و روابط فیلوژنتیکی آن‌ها را بررسی کنیم.امروزه تعیین توالی DNA به روش های مختلفی انجام می‌شود که دو تا زا مهم ترین های آن ها روش توالی یابی سنگر و ماکسام –گیلبرت است .

 ✔ مقاصد پزشکی قانونی و تعیین هویت: با توجه به نقش پررنگ پروفایل DNA در تشخیص مجرمین و تحلیل حضور افراد در صحنه های جرم، استخراج DNA از انواع نمونه های یافت شده در صحنه جرم(خون –مو- ناخن و..) اهمیت بسزائی دارد.با توجه به منحصر به فرد بودن پروفایل DNA  هر فرد می‌توان حتی با مقدار بسیار کم از نمونه به نتایج مطلوب رسید.

جالب است بدانید ۹۹٫۹ درصد DNA دو انسان کاملا یکسان است. اما چیزی که انسان ها را از همدیگر متمایز می‌سازد، آن ۰٫۱ درصد است. در واقع ۰٫۱ درصد توالی  DNAدر افراد مختلف متفاوت می‌باشد، چیزی که باعث منحصر به فرد بودن هرانسان می‌شود. این توالی ها که به اصطلاح توالی های STR نام دارند در هر فرد به تعداد متفاوتی وجود دارند و در واقع بخشی هستند که افراد در پزشکی قانونی هنگام انجام آزمایش DNA از آن استفاده می‌کنند.

تجهیزات مرتبط با استخراج DNA

✔برای مشاهده جزییات تجهیزات و دستگاه های آزمایشگاه ژنیران اینجا کلیک کنید.