آگار CLED: ترکیب، اصول، روش تهیه، نتایج و کاربرد

مقدمه‌ای بر آگار CLED

محیط کشت کمبود سیستین-لاکتوز- الکترولیت (CLED) که ابتدا توسط Sandys توصیف شد و بعداً توسط Mackey و Sandys اصلاح شد، عموماً برای تشخیص باکتریولوژی (Bacteriology) ادراری معمول به عنوان یک محیط غیر انتخابی استفاده می‌شود که می‌تواند از رشد اکثر عوامل بیماری‌زای ادراری پشتیبانی کند.

این آگار یک محیط کشت افتراقی است که برای جداسازی و شمارش باکتری‌های ادرار استفاده می‌شود. این محیط از رشد همه عوامل بیماری‌زای بالقوه ادراری پشتیبانی می‌کند و مورفولوژی مجزای کلونی را ارائه می‌دهد. همچنین از رشد پاتوژن‌ها و آلاینده‌های ادراری حمایت کرده و به دلیل عدم وجود الکترولیت، افتراق کلنی خوبی را بدون پخش گونه‌های پروتئوس (Proteus) ارائه می‌دهد.

ترکیبات آگار CLED

pH: 0.2 +/- 7.3

اصول آگار CLED

CLED شامل آنزماتیک دایجست کازئین، آنزماتیک دایجست ژلاتین و عصاره گوشت گاو است که نیتروژن، ویتامین‌ها، مواد معدنی و اسیدهای آمینه ضروری برای رشد ارگانیسم را فراهم می‌کند.

ال سیستین از رشد کلنی‌های کوچک باکتری کلیفرم (Coliform) وابسته به سیستئین (Cysteine) حمایت می‌کند. لاکتوز یک کربوهیدرات قابل تخمیر است که کربن و انرژی را تامین می‌کند. ارگانیسم‌هایی که قادر به تخمیر لاکتوز هستند، PH را کاهش داده و رنگ محیط را از سبز به زرد تغییر می‌دهند. تغییر رنگ با نشانگر pH برومتیمول بلو نمایان می‌شود. آگار موجود در محیط هم عامل انجماد است.

روش آماده‌سازی CLED Agar

• 36 گرم از محیط را در یک لیتر آب مقطر بریزید.
• آن را خوب مخلوط کرده و با هم زدن مکرر حرارت داده و به مدت یک دقیقه بجوشانید تا کاملا حل شود.
• سپس در دمای 121 درجه سانتی‌گراد به مدت 15 دقیقه، آن را در اتوکلاو قرار دهید.
• محیط را تا دمای 50 درجه سانتی‎گراد خنک کرده، خوب مخلوط کنید و در پلیت‌ها بریزید. وقتی محیط جامد شد، پلیت‌ها را برعکس کنید تا از رطوبت اضافی جلوگیری شود. محیط آماده شده باید در دمای 8 تا 15 درجه سانتی‌گراد نگه‌داری شود.

مشخصات کلنی ارگانیسم‌های مختلف در آگار CLED

آگار CLED پاسخ‌های مختلفی به کشت میکروارگانیسم‌های مختلف در اتمسفر و دمای مناسب پس از انکوباسیون 18 تا 24 ساعته نشان می‌دهد:

موارد استفاده از آگار CLED

• برای کشت معمول ادرار و برای رشد و شمارش ارگانیسم‌های دستگاه ادراری استفاده می‌شود.
• به افتراق ارگانیسم‌های تخمیر‌کننده لاکتوز و غیر تخمیرکننده لاکتوز کمک می‌کند.
• برای جداسازی و شمارش بسیاری از میکروارگانیسم‌های هوازی، مانند انتروباکتریاسه (Enterobacteriaceae)، سودوموناس و سایر باکتری‌های میله‌ای گرم منفی غیرتخمیری نظیر انتروکوک‌ها، استافیلوکوک‌ها، گونه‌های کاندیدا (Candida) و بسیاری دیگر از نمونه‌های ادراری مناسب است.

محدودیت‌های آگار CLED

• استرپتوکوک‌ها و سایر ارگانیسم‌هایی که برای رشد به خون یا سرم نیاز دارند، ممکن است به اندازه کافی در این محیط تکثیر نشوند و یا ممکن است نیاز به انکوباسیون طولانی مدت داشته باشند. بنابراین در صورتی که وجود چنین ارگانیسم‌هایی مورد انتظار است، نمونه باید در پلیت بلاد آگار (blood agar) کشت شود.

• پاتوژن‌های دستگاه تناسلی مانند نایسریا گونوره (Neisseria gonorrhoeae)، گاردنرلا واژینالیس (Gardnerella vaginalis)، کلامیدیا (Chlamydia)، اورهاپلاسما (Ureaplasma) و یا سایر ارگانیسم‌های سخت‌پسند (Fastidious) در این محیط رشد نمی‌کنند.
• آزمایشات سرولوژیکی با استفاده از کشت خالص برای شناسایی کامل ضروری است.

جهت خرید و یا استعلام قیمت با ما تماس بگیرید یا در واتسپ پیام بزارید

02186073470

مطالب مرتبط با آگار CLED:

• تست لیزین آیرون آگار (تست LIA): روش، کاربردها و تفسیر
• تست کلیگر آیرون آگار (تست KIA): اساس، محیط کشت، روش، نتایج، موارد استفاده
• آگار ستریماید (Cetrimide Agar): ترکیب، اساس، کاربردها، آماده سازی و مورفولوژی کلنی
• EMB آگار: فرمول، اصول، آماده سازی، نتایج و موارد استفاده
• محیط کشت PDA (پوتیتو دکستروز آگار): اساس، کاربرد، ترکیبات

منبع

مترجم: صادق حسینی‌کیا