مقدمه
تست لوله زایا یک آزمایش غربالگری است که برای افتراق کاندیدا آلبیکنس از سایر مخمرها استفاده میشود. تشکیل لوله زایا (GT) برای اولین بار توسط Reynolds و Braude در سال 1956 گزارش شد. هنگامی که کاندیدا در سرم انسان یا گوسفند در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 3 ساعت رشد میکند، لولههای زایایی تشکیل میدهد که میتواند با لایه های KOH مرطوب به عنوان رشتهای تشخیص داده شود. رشد حاصل از سلولهای مخمر برای Candida albicans و Candida dubliniensis مثبت است. تقریباً 95 تا 97 درصد از کاندیدا آلبیکنس جدا شده هنگام انکوبه شدن در محیطهای پروتئینی، لولههای زایا ایجاد میکنند.
اصل تست لوله زایا
تشکیل لوله زایا با افزایش سنتز پروتئین و اسید ریبونوکلئیک همراه است. محلولهای Germ Tube حاوی عصاره سویا تریپتیک و سرم جنین گاو، مواد مغذی ضروری برای سنتز پروتئین هستند. برای ثبات لیوفیلیزه میشود. لوله زایا یکی از عوامل بیماریزای کاندیدا آلبیکنس است. این یک آزمایش سریع برای شناسایی احتمالی C. albicans است.
مراحل تست لوله زایا
- 5 میلی لیتر سرم گوسفند یا انسان را در یک لوله کوچک قرار دهید.
نکته: به جای سرم انسانی میتوان از سرم جنین گاوی نیز استفاده کرد.
- با استفاده از پیپت پاستور، کلنی مخمر را لمس کرده و به آرامی آن را در سرم امولسیون قرار دهید.
توجه: بزرگی بیش از حد تلقیح مانع از تشکیل لولههای زایا میشود.
- لوله را در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 2 تا 4 ساعت انکوبه کنید.
- یک قطره از سرم را برای معاینه به لام منتقل کنید.
- پوشاندن و بررسی میکروسکوپی.
نتایج و تفسیر تست لوله زایا
تست مثبت: یک اکستنشن کوتاه هیف (رشتهای) که به صورت جانبی از یک سلول مخمر ایجاد میشود، بدون انقباض در نقطه مبدا. لوله زایا نصف عرض و 3 تا 4 برابر طول سلول مخمر است و هیچ هستهای وجود ندارد. مثال: کاندیدا آلبیکنس و کاندیدا دوبلینسیس.
تست منفی: هیچ امتداد هیف (رشته ای) ناشی از یک سلول مخمر یا یک امتداد هیف کوتاه منقبض در نقطه مبدا وجود ندارد. به عنوان مثال: C. tropicalis، C. glabrata و سایر مخمرها.
کنترل کیفیت در تست لوله زایا
کنترل مثبت: C. albicans (ATCC 10231)
کنترل منفی: C. tropicalis (ATCC 13803) ، C. glabrata (ATCC 2001)
محدودیتهای تست لوله زایا
- tropicalis ممکن است پسودوهیفهای اولیه را تشکیل دهد که احتمال دارد به اشتباه به عنوان لولههای زایا تعبیر شود.
- مخمری که قبلاً Candida stellatoidea نام داشت، لولههای زایا نیز تولید میکند. با این حال، با albicans ترکیب شده است و دیگر به عنوان گونه جداگانه وجود ندارد.
- این آزمایش تنها بخشی از طرح کلی برای شناسایی مخمرها است. برای شناسایی قطعی آزمایشات بیشتری لازم است.
مترجم: امید آهنگریان ابهری
همچنین مطالب علمی بیشتری بخوانید:
تست موتیلیتی (Motility Test): اصول، رویه، کاربردها و تفسیر
بجز تست جرم تیوب چه تست های دیگری وجود دارد؟
✅ تست جرم تیوب: بررسی مقدار محیط در هر لوله یا پتری.
✅ تست رشدپذیری (GPT): بررسی توان رشد میکروارگانیسمهای استاندارد.
✅ تست استریلیتی: اطمینان از عدم آلودگی محیط بدون تلقیح.
✅ تست pH: بررسی صحت pH محیط.
✅ تست قوام آگار: بررسی استحکام محیط جامد.
✅ تست ظاهر: بررسی رنگ، یکنواختی و کدورت.
✅ تست رطوبت: برای محیطهای خشک یا پودری.
✅ تست انتخابی بودن: بررسی عملکرد آنتیبیوتیکها یا مواد مهارکننده.
سلام وقت بخیر. ببخشید یه سوال دارم . ایا میشه در تست لوله ی زایا به جای سرم از پلامسمای خرگوش استفاده کنم ؟
سلام، طبق استاندارد خیر. اما تجربی میشه این کار رو انجام داد.