اطلاعات عمومی
بافرهای PCR چه هستند؟
بافرهای PCR چه هستند؟
یک سیستم بافری مطلوب برای انجام موفقیت آمیز واکنش PCR ضروری است. نتایج قابل اطمینان PCR به عوامل زیادی بستگی دارد: کیفیت DNA و پرایمر ها و همچنین ابزار های دخیل در PCR.
PH مناسب برای واکنش PCR، 8 الی 9.5 است که توسط Tris – HCl موجود در بافر
بافر مبتنی بر Tris مختلفی برای PCR های مختلف تهیه شده است. این بافر ها در غلظت 10X آماده می شود و همراه با MgCl2 15 میلی مولار عرضه می شوند.
برای راحتی کار هم می توان بافر را به تنهایی به صورت تجاری تهییه کرد و هم می توان ترکیب آماده مسترمیکس را تهییه کرد که خود بافر را درونش دارد. از انواع بافر های تجاری موجود در بازار می توان به موارد زیر اشاره کرد:
- بافر 10 برابر آمونیوم
- بافر استاندارد 10 برابر
- بافر ترکیبی 10 برابر
- 5x PCR Buffer RED
- 4x GC Buffer I & 4x GC Buffer II
- PCR Grade Water
- محلول تقویت کننده بتائین 5 M
اجزای اصلی بافر PCR عبارتند از:
- TRIS – HCl به منظور حفظ شرایط پایدار PH
- یون منیزیم دوبار مثبت که کوفاکتور آنزیم پلیمراز است.
- KCl که با یونیزه ضدن در محیط واکنش اتصال اسید نوکلئیک با پرایمر و نوکلئوتید ها را تسهیل می کند.
- ژلاتین برای غلظت دادن به واکنش
