ویدیو های آموزشی, ایمونواسی, تکنیک ها, ویکی ژن
تعیین غلظت پروتئین به روش BCA
برای انجام تست وسترن بلات لازم است که میزان مشخصی از پروتئین را در ژل لود کنیم بنابراین اولین مرحله، تعیین غلظت پروتئین می باشد. چند روش پر کاربرد عبارتند از:
- جذب اشعه فرا بنفش (UV)
- Lowry
- برادفورد یا Coomassie brilliant blue
- Bicinchoninic اسید(BCA)
روش BCA بر اساس کاهش یون های مس کار می کند. در مرحله اول پروتیین با Cu۲+واکنش داده و تولید Cu۱+می کند. در مرحله دوم Bicinchoninic اسید با Cu۱+ترکیب شده و رنگ آبی محلول را به بنفش تغییر می دهد. شدت رنگ بنفش تولید شده با غلظت پروتئین متناسب است. نمونه ها در دستگاه اسپکتروفتومتر با طول موج ۵۶۲ خوانده می شوند. در این روش از غلظت های مشخصی از BSA به عنوان استاندارد استفاده می شود. دامنه اندازه گیری این روش ug/ml20-2000 می باشد.
همچنین از صفحات زیر دیدن فرمایید:
سلام وقت بخیر. من ی نمودار BCA دارم میخواستم تحلیل کنم امکانش هست کمکم کنید.
سلام دوست عزیز
ما درخدمتتون هستیم. لطفا با آزمایشگاه تماس بگیرید تا کارشناسان ما شما را راهنمایی کنند..