3,300,000 تومان–4,070,000 تومان
نکات خرید رده سلولی Calu-3
سلول های اپیتلیال Calu-3 از بافت ریه مشتق شده از یک بیمار مرد 25 ساله سفید پوست مبتلا به آدنوکارسینوم ریه که درمان قبلی با سیتوکسان، بلئومایسین و آدریامایسین دریافت کرده بود، جدا شده است. این رده سلولی برای انتشار SARS-CoV-2 در شرایط آزمایشگاهی ارزشمند است، میزبان انتقال مناسب است و در تحقیقات سرطان و سم شناسی کاربرد دارد.
سطح ایمنی زیستی: BSL1 (بیشتر بدانید)
| رده محصولات | سلول های انسانی |
| ارگانیسم | انسان خردمند |
| نوع سلول | اپی تلیال |
| مورفولوژی | اپیتلیال |
| بافت | ریه |
| بیماری | آدنوکارسینوما |
| کاربردها | کشت سلولی سه بعدی
بیوتکنولوژی صنعتی سم شناسی تولید زیستی |
| شرایط نگهداری | فاز بخار نیتروژن مایع |
| استفاده در نظر گرفته شده | این رده سلولی میزبان ترانسفکشن مناسبی است و می تواند برای انتشار SARS-CoV-2 در شرایط آزمایشگاهی استفاده شود. |
| حجم فلاسک | T25, T75 |
|---|
خصوصیات
| خصوصیات رشد | چسبنده |
| یافته های کلینیکی | بیمار درمان قبلی با سیتوکسان، بلئومایسین و آدریامایسین دریافت کرده بود. |
| نژاد | سفید |
| جنسیت | مرد |
| سن | 25 ساله |
| کاریوتایپ | تعداد کروموزوم خط بنیادی هیپوتریپلوئید است و جزء 2S در 1.4٪ رخ می دهد. تقریباً 20 نشانگر در اکثر متافازهای S مشترک بودند که از آنها i (1p)، t (12;؟) و t (18;؟) به طور کلی جفت شدند. t(6t؟) یک بخش HSR از بازوی q داشت و M7 دو انقباض ثانویه داشت. کروموزوم های طبیعی 1، 13، 15 و 17 وجود نداشتند و X دیزومیک بود. هیچ کروموزوم Y در آماده سازی رنگ آمیزی QM تشخیص داده نشد. توجه: اطلاعات سیتوژنتیک بر اساس ذخیره اولیه بذر در ATCC است. بی ثباتی سیتوژنتیک در مقالات برای برخی از رده های سلولی گزارش شده است. |
| تومورزایی | بله، آدنوکارسینوم درجه یک به خوبی تمایز یافته را در موش های برهنه تشکیل می دهد |
| متاستاز | پلورال افیوژن |
| بیان آنتی ژن | Blood Type A; Rh+ |
| ژنهای بیان شده | Blood Type A; Rh+ |
| ایزوآنزیم ها | AK-1, 1
ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1-2 Me-2, 1 PGM1, 1 PGM3, 1-2 |
| نظرات | بیمار درمان قبلی با سیتوکسان، بلئومایسین و آدریامایسین دریافت کرده بود.. |
اطلاعات نگهداری
| دستورالعمل باز کردن و ذخیره سازی
|
1- تمام ظروف را از نظر نشتی یا شکستگی بررسی کنید.
2- سلول های یخ زده را از بسته بندی یخ خشک خارج کرده و بلافاصله سلول ها را در دمای زیر 130- درجه سانتی گراد ترجیحاً در بخار نیتروژن مایع قرار دهید تا آماده استفاده شود.
|
| محیط کامل
|
محیط پایه برای این رده سلولی DMEM High glucose
برای ساختن محیط رشد کامل، سرم جنین گاوی به غلظت نهایی 10% را به محیط پایه اضافه کنید.
|
| درجه حرارت | 37 درجه |
| شرایط نگهداری
|
برای اطمینان از بالاترین سطح زنده ماندن، ویال را ذوب کرده و در اسرع وقت پس از دریافت، کشت را آغاز کنید. اگر در بدو ورود، ادامه نگهداری کشت منجمد ضروری باشد، باید در فاز بخار نیتروژن مایع و نه در دمای 70- درجه سانتی گراد نگهداری شود. نگهداری در دمای -70 درجه سانتیگراد باعث از بین رفتن قابلیت زنده ماندن می شود.
1- ویال را با هم زدن ملایم در حمام آب 37 درجه سانتی گراد ذوب کنید. برای کاهش احتمال آلودگی، O-ring و کلاهک را خارج از آب نگه دارید. ذوب شدن باید سریع باشد (تقریباً 2 دقیقه). 2- به محض ذوب شدن محتویات، ویال را از حمام آب خارج کرده و با غوطه ور کردن یا پاشیدن با اتانول 70 درصد آن را ضدعفونی کنید. تمام عملیات از این نقطه به بعد باید در شرایط سخت اسپتیک انجام شود. 3- محتویات ویال را به یک فلاسک کشت بافت 75 سانتی متر مربعی منتقل کنید و با محیط کشت کامل توصیه شده رقیق کنید (اطلاعات دسته ای خاص را برای نسبت رقت توصیه شده ببینید). مهم است که از قلیایی بودن بیش از حد محیط در طول بازیابی سلول ها جلوگیری شود. پیشنهاد می شود، قبل از افزودن محتویات ویال، ظرف کشت حاوی محیط رشد حداقل به مدت 15 دقیقه در انکوباتور قرار داده شود تا محیط به pH طبیعی خود (7.0 تا 7.6) برسد. 4- کشت را در دمای 37 درجه سانتی گراد در انکوباتور مناسب انکوبه کنید. در صورت استفاده از محیطی که در این برگه محصول توضیح داده شده است، CO2 5٪ در جو هوا توصیه می شود. اگر مایل هستید که عامل محافظ انجماد فوراً حذف شود یا سوسپانسیون سلولی غلیظ تری به دست آید، سوسپانسیون سلولی را در حدود 125 x g به مدت 5 تا 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید. مایع رویی را دور بریزید و سلول ها را با محیط رشد تازه با نسبت رقت توصیه شده در اطلاعات دسته خاص، مجدداً معلق کنید.
|
| روش پاساژ دادن
|
حجم ها برای یک فلاسک 75 سانتی متر مربع داده شده است. مقدار محیط تفکیک مورد نیاز را متناسب با ظروف کشت با اندازه های دیگر افزایش یا کاهش دهید.
1- محیط کشت را بردارید و دور بریزید. 2- به طور خلاصه لایه سلولی را با محلول تریپسین 0.25- 0.53 (w/v) میلی مولار EDTA شستشو دهید تا تمام آثار سرمی حاوی مهارکننده تریپسین پاک شود. 3- 2 تا 3 میلی لیتر محلول Trypsin-EDTA را به فلاسک اضافه کنید و سلول ها را زیر میکروسکوپ معکوس مشاهده کنید تا لایه سلولی پراکنده شود (معمولاً در عرض 5 تا 15 دقیقه). توجه: برای جلوگیری از انباشته شدن، سلول ها را با ضربه زدن یا تکان دادن فلاسک تکان ندهید در حالی که منتظر جدا شدن سلول ها هستید. سلول هایی که به سختی جدا می شوند ممکن است در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار داده شوند تا پراکندگی آنها تسهیل شود. 4- 6 تا 8 میلی لیتر از محیط رشد کامل را اضافه کنید و سلول ها را با پیپت کردن به آرامی آسپیره کنید. 5- مقدار مناسبی از سوسپانسیون سلولی را به فلاسک های کشت جدید اضافه کنید. 6- کشت ها را در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه کنید. مراحل پاساژ: نسبت 1:3 و 1:6 توصیه می شود تعویض محیط: یک یا دو بار بین پاساژ |
| معرف برای انجماد
|
95% محیط کامل + 5% v/v DMSO |
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.