تست سولفید سرب: تعریف، اصول، روش، نتیجه و موارد استفاده

فهرست مطالب نمایش

تعریف تست سولفید سرب

تست سولفید سرب یا تست استات سرب (Lead acetate) یک آزمایش بیوشیمیایی برای شناسایی اسیدهای آمینه مانند سیستئین (Cysteine) و سیستین (Cystine) است. این تست یک آزمایش اختصاصی برای شناسایی اسیدهای آمینه حاوی گوگرد، گروه S-S در سیستئین و گروه S-H در سیستین می‌باشد. این تست را تست استات سرب نیز می‌نامند، زیرا شناساگر این تست، استات سرب است. اگرچه این تست مخصوص شناسایی اسیدهای آمینه حاوی گوگرد است، اما متیونین (Methionine) در این تست نتیجه مثبتی نمی‌دهد.

اهداف تست سولفید سرب

برای تشخیص وجود اسیدهای آمینه حاوی گوگرد در نمونه.
برای تشخیص سیستئین و سیستین حاوی پروتئین در یک نمونه مشخص.
برای افتراق بین اسیدهای آمینه حاوی گوگرد و غیر گوگرد.

اصول تست سولفید سرب

اصول این تست بر اساس شناسایی گوگرد در یک محلول با تجزیه گروه S-H یا S-S در اسیدهای آمینه تحت شرایط قلیایی قوی می‌باشد. اسیدهای آمینه مانند سیستئین و سیستین، گوگرد را در یک شرایط قلیایی قوی در دمای بالا در محیط آزاد می‌کنند. سپس گوگرد با NaOH قلیایی ترکیب و Na₂ را تشکیل می‌دهد. Na₂S به این ترتیب با استات سرب واکنش داده و سولفید سرب را تشکیل می‌دهد که منجر به ایجاد یک رسوب سیاه رنگ می‌شود. برای انجام واکنش، یون‌های آزاد گوگرد باید در محیط وجود داشته باشد.

واکنش

Cysteine + 2NaOH → Serine + Na₂S + H₂O

Pb(CH₃COO)₂ + NaOH → Pb(OH)₂ + 2CH₃COONa

Pb(OH)₂ + 2NaOH → Pb(ONa)₂ + 2H₂O

Na₂S + Pb(ONa)₂ + H₂O → PbS (رسوب سیاه) + 4NaOH

نیازمندی‌ها

شناساگر

محلول 2% استات سرب در آب
NaOH 40 درصد
نمونه

تجهیزات مورد نیاز

لوله‌های آزمایش
پایه لوله آزمایش
پیپت‌ها

روش تست سولفید سرب

در یک لوله آزمایش، 2 میلی‌لیتر از محلول اسید آمینه بریزید. به آن 2 میلی‌لیتر NaOH اضافه کنید و محلول را به مدت یک دقیقه بجوشانید.
پس از خنک شدن لوله آزمایش، چند قطره استات سرب به محلول اضافه کنید.
سپس لوله آزمایش را از نظر تشکیل رسوب بررسی کنید.

نتیجه و تفسیر تست سولفید سرب

تست مثبت: یک تست مثبت در تست سولفید سرب با تشکیل رسوب سیاه رنگ در ته لوله آزمایش نشان داده می‌شود. این امر نشان‌دهنده وجود سیستئین یا سیستین در محلول است.
تست منفی: نتیجه منفی در تست سولفید سرب با عدم وجود رسوب سیاه در لوله آزمایش نشان داده می‌شود. این موضوع نشان‌دهنده عدم وجود سیستئین یا سیستین است.

موارد استفاده از تست سولفید سرب

این تست برای شناسایی اسیدهای آمینه حاوی گوگرد مانند سیستئین و سیستین استفاده می‌شود.
به تشخیص گروه‌های مختلف اسیدهای آمینه کمک می‌کند.
تشخیص سیستین در ادرار یک علامت پاتولوژیک مربوط به بیماری‌هایی مانند سنگ سیستین در کلیه‌ها و مثانه است.

محدودیت‌ها

متیونین در این آزمایش نتیجه مثبتی نمی‌دهد، زیرا گوگرد موجود در پیوند تیواستر (Thioester) مربوطه به متیونین، در واکنش با NaOH آزاد نمی‌شود.
افزودن استات سرب اضافی به محلول ممکن است منجر به ایجاد رسوب سفید رنگ شود.

همچنین بخوانید:

منبع

مترجم: صادق حسینی‌کیا

از این مطلب چقدر راضی بودید؟

روی ستاره کلیک کنید تا نظرتون ثبت بشه