3,300,000 تومان–4,070,000 تومان

راهنمای خرید رده سلولی MC3T3

MC3T3-E1 ساب کلون 4 پری استئوبلاست از رده سلولی MC3T3-E1 کلون شده اما از نظر فنوتیپی ناهمگن جدا شد. این ساب کلون برای تمایز بالای استئوبلاست و کانی سازی پس از رشد در محیط حاوی اسید اسکوربیک انتخاب شد. این رده سلولی مدل خوبی برای مطالعه تمایز استئوبلاست در شرایط آزمایشگاهی، به ویژه سیگنالینگ ECM است. رفتار آن شبیه استئوبلاست های اولیه است.

سطح ایمنی زیستی: BSL1 (بیشتر بدانید)

کاتالوگ انگلیسی ATCC رده سلولی MC3T3

جهت خرید یا مشاوره با ما تماس بگیرید

رویه ارسال سفارشات

حجم فلاسک

شناسه محصول: نامعلوم دسته: رده سلولی

رده محصولات	سلول های حیوانی
ارگانیسم	موش صحرایی
نوع سلول	پرواستئوبلاست
مورفولوژی	فیبروبلاست
بافت	استخوان
کاربردها	کشت سلولی سه بعدی
شرایط نگهداری	فاز بخار نیتروژن مایع

کاربردهای اختصاصی

این رده های سلولی مدل های خوبی برای مطالعه تمایز استئوبلاست در شرایط آزمایشگاهی، به ویژه سیگنالینگ ECM هستند. آنها رفتاری شبیه به استئوبلاست های اولیه دارند.

استفاده در نظر گرفته شده

این محصول فقط برای استفاده تحقیقات آزمایشگاهی در نظر گرفته شده است. این برای هیچ گونه استفاده درمانی حیوانی یا انسانی، مصرف انسانی یا حیوانی، یا هر گونه استفاده تشخیصی در نظر گرفته نشده است.

این رده سلولی میزبان مناسب ترانسفکشن است

حجم فلاسک	T25, T75

خصوصیات

خصوصیات رشد	چسبنده
استخراج	یک سری از ساب کلون ها از رده سلولی MC3T3-E1 کلون شده اما از نظر فنوتیپی ناهمگن جدا شدند. ساب کلون ها پس از رشد در محیط حاوی اسید اسکوربیک برای تمایز زیاد یا کم استئوبلاست و کانی سازی انتخاب شدند.
سن	نوزاد
نژاد	C57BL/6
تومورزایی	بله، در موش های دارای نقص ایمنی (تشکیل استخوانچه های استخوانی مانند)
ژنهای بیانی	کلاژن
نظرات	رده های MC3T3-E1 Subclone 4 و MC3T3 Subclone 14 سطوح بالایی از تمایز استئوبلاست را پس از رشد در اسید اسکوربیک و 3 تا 4 میلی مولار فسفات معدنی نشان می دهند. آنها پس از 10 روز یک ماتریکس خارج سلولی (ECM) را تشکیل می دهند.

اطلاعات نگهداری

دستورالعمل باز کردن و ذخیره سازی

1- تمام ظروف را از نظر نشتی یا شکستگی بررسی کنید.

2- سلول های یخ زده را از بسته بندی یخ خشک خارج کرده و بلافاصله سلول ها را در دمای زیر 130- درجه سانتی گراد ترجیحاً در بخار نیتروژن مایع قرار دهید تا آماده استفاده شود.

محیط کامل

محیط پایه برای این رده سلولی DMEM High glucose

برای ساختن محیط رشد کامل، سرم جنین گاوی به غلظت نهایی 10% را به محیط پایه اضافه کنید.

درجه حرارت

37 درجه

شرایط نگهداری

برای اطمینان از بالاترین سطح زنده ماندن، ویال را ذوب کرده و در اسرع وقت پس از دریافت، کشت را آغاز کنید. اگر در بدو ورود، ادامه نگهداری کشت منجمد ضروری باشد، باید در فاز بخار نیتروژن مایع و نه در دمای 70- درجه سانتی گراد نگهداری شود. نگهداری در دمای -70 درجه سانتیگراد باعث از بین رفتن قابلیت زنده ماندن می شود.

1- ویال را با هم زدن ملایم در حمام آب 37 درجه سانتی گراد ذوب کنید. برای کاهش احتمال آلودگی، O-ring و کلاهک را خارج از آب نگه دارید. ذوب شدن باید سریع باشد (تقریباً 2 دقیقه).

2- به محض ذوب شدن محتویات، ویال را از حمام آب خارج کرده و با غوطه ور کردن یا پاشیدن با اتانول 70 درصد آن را ضدعفونی کنید. تمام عملیات از این نقطه به بعد باید در شرایط سخت اسپتیک انجام شود.

3- محتویات ویال را به یک فلاسک کشت بافت 75 سانتی متر مربعی منتقل کنید و با محیط کشت کامل توصیه شده رقیق کنید (اطلاعات دسته ای خاص را برای نسبت رقت توصیه شده ببینید). مهم است که از قلیایی بودن بیش از حد محیط در طول بازیابی سلول ها جلوگیری شود. پیشنهاد می شود، قبل از افزودن محتویات ویال، ظرف کشت حاوی محیط رشد حداقل به مدت 15 دقیقه در انکوباتور قرار داده شود تا محیط به pH طبیعی خود (7.0 تا 7.6) برسد.

4- کشت را در دمای 37 درجه سانتی گراد در انکوباتور مناسب انکوبه کنید. در صورت استفاده از محیطی که در این برگه محصول توضیح داده شده است، CO2 5٪ در جو هوا توصیه می شود.

اگر مایل هستید که عامل محافظ انجماد فوراً حذف شود یا سوسپانسیون سلولی غلیظ تری به دست آید، سوسپانسیون سلولی را در حدود x g 125به مدت 5 تا 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید. مایع رویی را دور بریزید و سلول ها را با محیط رشد تازه با نسبت رقت توصیه شده در اطلاعات دسته خاص، مجدداً معلق کنید.

روش پاساژ دادن

حجم ها برای یک فلاسک 75 سانتی متر مربع داده شده است. مقدار محیط تفکیک مورد نیاز را متناسب با ظروف کشت با اندازه های دیگر افزایش یا کاهش دهید.

1- محیط کشت را بردارید و دور بریزید.

2- به طور خلاصه لایه سلولی را با محلول تریپسین 0.25% (w/v) – 0.53 میلی مولار EDTA شستشو دهید تا تمام آثار سرمی حاوی مهارکننده تریپسین پاک شود.

3- 2 تا 3 میلی لیتر محلول Trypsin-EDTA را به فلاسک اضافه کنید و سلول ها را زیر میکروسکوپ معکوس مشاهده کنید تا لایه سلولی پراکنده شود (معمولاً در عرض 5 تا 15 دقیقه).

توجه: برای جلوگیری از انباشته شدن، سلول ها را با ضربه زدن یا تکان دادن فلاسک تکان ندهید در حالی که منتظر جدا شدن سلول ها هستید. سلول هایی که به سختی جدا می شوند ممکن است در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار داده شوند تا پراکندگی آنها تسهیل شود.

4- 6 تا 8 میلی لیتر از محیط رشد کامل را اضافه کنید و سلول ها را با پیپت کردن به آرامی آسپیره کنید.

5- مقدار مناسبی از سوسپانسیون سلولی را به فلاسک های کشت جدید اضافه کنید.

6- کشت ها را در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه کنید.

مراحل پاساژ: نسبت 1:6 و 1:8 توصیه می شود

تعویض محیط: هر 2 تا 3 روز

معرف برای انجماد

95% محیط کامل + 5% v/v DMSO