3,300,000 تومان–4,070,000 تومان

راهنمای خرید رده سلولی MCF-7

سلول های اپیتلیال جدا شده از بافت پستان یک بیمار مونث 69 ساله سفید پوست مبتلا به آدنوکارسینوم متاستاتیک است. از این سلول ها در تحقیقات سرطان سینه استفاده می شود.

سطح ایمنی زیستی: BSL1 (بیشتر بدانید)

کاتالوگ انگلیسی ATCC رده سلولی MCF-7

جهت خرید یا مشاوره با ما تماس بگیرید

رویه ارسال سفارشات

حجم فلاسک

شناسه محصول: نامعلوم دسته: رده سلولی, فروش

رده محصولات	سلول های انسانی
ارگانیسم	انسان خردمند، انسان
مورفولوژی	اپیتلیال
بافت	پستان
بیماری	آدنوکارسینوما
کاربردها	کشت سه بعدی ایمونوانکولوژی
شرایط نگهداری	فاز بخار نیتروژن مایع

استفاده در نظر گرفته شده

این سلول ها به عنوان میزبان ترانسفکشن مناسب هستند.

حجم فلاسک	T25, T75

خصوصیات

خصوصیات رشد	چسبنده
سن	69 ساله
جنسیت	زن
نژاد	سفید
کاریوتایپ	شماره مودال = 82; محدوده = 66 تا 87. تعداد کروموزوم‌های پایه از هایپرتریپلوئیدی تا هایپوتتراپلوئیدی متغیر بود، که جزء S2 در 1٪ اتفاق می‌افتد. 29 تا 34 کروموزوم نشانگر در هر متافاز S وجود داشت. 24 تا 28 نشانگر در حداقل 30 درصد سلول ها رخ داده است و به طور کلی یک نشانگر بزرگ ساب متاسانتریک (M1) و 3 نشانگر ساب تلوسنتریک بزرگ (M2، M3 وM4 ) در بیش از 80 درصد متافازها قابل تشخیص است. هیچ DM شناسایی نشد. کروموزوم 20 پوچ و X دیزومی بود.
انکوژن	wnt7b
متاستاتیک:	پلورال افیوژن
بیان آنتی ژن:	گروه خونی +O; Rh
بیان کننده مارکرهای	گیرنده استروژن
بیان کننده ژنهای	پروتئین اتصال دهنده فاکتور رشد شبه انسولین (IGFBP) BP-2 پروتئین اتصال دهنده فاکتور رشد شبه انسولین (IGFBP) BP-4
ایزوآنزیم ها	AK-1, 1 ES-D, 1-2 G6PD, B GLO-I, 1-2 PGM1, 1-2 PGM3, 1
نظرات	رده MCF7 چندین ویژگی از اپیتلیوم پستان تمایز یافته، از جمله توانایی پردازش استرادیول از طریق گیرنده های استروژن سیتوپلاسمی و قابلیت تشکیل گنبد را حفظ می کند. سلول ها انکوژن WNT7B را بیان می کنند. رشد سلول های MCF7 توسط فاکتور نکروز تومور آلفا (TNF آلفا) مهار می شود. ترشح IGFBP را می توان با درمان با آنتی استروژن ها تعدیل کرد.

اطلاعات نگهداری

دستورالعمل باز کردن و ذخیره سازی

1- تمام ظروف را از نظر نشتی یا شکستگی بررسی کنید.

2- سلول های یخ زده را از بسته بندی یخ خشک خارج کرده و بلافاصله سلول ها را در دمای زیر 130- درجه سانتی گراد ترجیحاً در بخار نیتروژن مایع قرار دهید تا آماده استفاده شود.

محیط کامل

محیط پایه برای این رده سلولی DMEM High glucose

برای ساختن محیط رشد کامل، سرم جنین گاوی به غلظت نهایی 10%را به محیط پایه اضافه کنید.

درجه حرارت

37 درجه

شرایط نگهداری

برای اطمینان از بالاترین سطح زنده ماندن، ویال را ذوب کرده و در اسرع وقت پس از دریافت، کشت را آغاز کنید. اگر در بدو ورود، ادامه نگهداری کشت منجمد ضروری باشد، باید در فاز بخار نیتروژن مایع و نه در دمای 70- درجه سانتی گراد نگهداری شود. نگهداری در دمای 70- درجه سانتیگراد باعث از بین رفتن قابلیت زنده ماندن می شود.

1- ویال را با هم زدن ملایم در حمام آب 37 درجه سانتی گراد ذوب کنید. برای کاهش احتمال آلودگی، O-ring و کلاهک را خارج از آب نگهدارید. ذوب شدن باید سریع باشد (تقریباً 2 دقیقه).

2- به محض ذوب شدن محتویات، ویال را از حمام آب خارج کرده و با غوطه ور کردن یا پاشیدن با اتانول 70 درصد آن را ضدعفونی کنید. تمام عملیات از این نقطه به بعد باید در شرایط سخت اسپتیک انجام شود.

3- محتویات ویال را به یک فلاسک کشت بافت 75 سانتی متر مربعی منتقل کنید و با محیط کشت کامل توصیه شده رقیق کنید (اطلاعات دسته ای خاص را برای نسبت رقت توصیه شده ببینید). مهم است که از قلیایی بودن بیش از حد محیط در طول بازیابی سلول ها جلوگیری شود. پیشنهاد می شود، قبل از افزودن محتویات ویال، ظرف کشت حاوی محیط رشد حداقل به مدت 15 دقیقه در انکوباتور قرار داده شود تا محیط به pH طبیعی خود (7/0 تا 7/6) برسد.

4- کشت را در دمای 37 درجه سانتی گراد در انکوباتور مناسب انکوبه کنید. در صورت استفاده از محیطی که در این برگه محصول توضیح داده شده است، %5 CO₂ در جو هوا توصیه می شود.

اگر مایل هستید که عامل محافظ انجماد فوراً حذف شود یا سوسپانسیون سلولی غلیظ تری به دست آید، سوسپانسیون سلولی را در حدود g125 به مدت 5 تا 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید. مایع رویی را دور بریزید و سلول ها را با محیط رشد تازه با نسبت رقت توصیه شده در اطلاعات دسته خاص، مجدداً معلق کنید.

روش پاساژ دادن

حجم ها برای یک فلاسک 75 سانتی متر مربع داده شده است. مقدار محیط تفکیک مورد نیاز را متناسب با ظروف کشت با اندازه های دیگر افزایش یا کاهش دهید.

1- محیط کشت را بردارید و دور بریزید.

2- به طور خلاصه لایه سلولی را با محلول 0/25% تریپسین و 0/53 میلی مولار EDTA شستشو دهید تا تمام آثار سرمی حاوی مهارکننده تریپسین پاک شود.

3- 2 تا 3 میلی لیتر محلول Trypsin-EDTA را به فلاسک اضافه کنید و سلول ها را زیر میکروسکوپ معکوس مشاهده کنید تا لایه سلولی پراکنده شود (معمولاً در عرض 5 تا 15 دقیقه).

توجه: برای جلوگیری از انباشته شدن، سلول ها را با ضربه زدن یا تکان دادن فلاسک تکان ندهید در حالی که منتظر جدا شدن سلول ها هستید. سلول هایی که به سختی جدا می شوند ممکن است در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار داده شوند تا پراکندگی آنها تسهیل شود.

4- 6 تا 8 میلی لیتر از محیط رشد کامل را اضافه کنید و سلول ها را با پیپت کردن به آرامی آسپیره کنید.

5- مقدار مناسبی از سوسپانسیون سلولی را به ظروف کشت جدید اضافه کنید.

6- کشت ها را در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه کنید.

نسبت پاساژ: نسبت ساب کالچر 1:3 تا 1:6 توصیه می شود.

تعویض محیط: هر 2 تا 3 روز

معرف برای انجماد

95% محیط کامل + 5% v/v DMSO