Price range: 7,700,000 تومان through 9,350,000 تومان

راهنمای خرید رده سلولی Du-145

Du-145 یک رده سلولی با مورفولوژی اپیتلیال است که از مغز یک مرد سفید 69 ساله مبتلا به سرطان پروستات جدا شد. این رده سلولی به عنوان میزبان ترانسفکشن مناسب است.

سطح ایمنی زیستی: BSL1 (بیشتر بدانید)

کاتالوگ انگلیسی ATCC رده سلولی Du-145

جهت مشاوره با ما تماس بگیرید

رویه تکمیل سفارشات

حجم فلاسک

صاف

شناسه محصول: نامعلوم دسته: رده سلولی

رده محصولات	سلول های انسانی
ارگانیسم	انسان خردمند، انسان
مورفولوژی	اپیتلیال
بافت	پروستات
بیماری	کارسینوما
کاربردها	کشت سلولی سه بعدی مطالعات کانسر علوم اعصاب
شرایط نگهداری	فاز بخار نیتروژن مایع

استفاده در نظر گرفته شده

این رده سلولی میزبان ترانسفکشن مناسبی است.

حجم فلاسک	T25, T75

خصوصیات

خصوصیات رشد	چسبنده
سن	69ساله
جنسیت	مرد
نژاد	سفید
کاریوتایپ	این یک رده سلولی هیپوتریپلوئید انسانی است. هر دو عدد کروموزوم 61 و 62 بیشترین میزان وقوع را در 30 شمارش متافاز داشتند. میزان پلوئیدی بالاتر 3 درصد بود. کروموزوم های t(11q12q)، del(11) (q23)، 16q+، del(9) (p11)، del(1) (p32) و 6 کروموزوم نشانگر دیگر در اکثر سلول ها یافت شدند. N13 معمولاً وجود نداشت. کروموزوم Y از طریق انتقال به بخش کروموزومی ناشناس غیر طبیعی است. کروموزوم X در یک نسخه وجود داشت.
تومورزایی	بله، در موش های برهنه؛ آدنوکارسینوم (درجه II) مطابق با اولیه پروستات را تشکیل می دهد
متاستاتیک	مغز
بیان کننده آنتی ژنهای	گروه خونی O و Rh+
ایزوآنزیم ها	AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 2 Me-2, 1-2 PGM1, 1 PGM3, 2
نظرات	این لاین به طور قابل تشخیصی به هورمون حساس نیست، فقط از نظر اسید فسفاتاز ضعیف مثبت است و سلول های جدا شده در آگار نرم کلنی تشکیل می دهند. سلول ها آنتی ژن پروستات را بیان نمی کنند. تجزیه و تحلیل فراساختاری هر دو رده سلولی و تومور اصلی میکروویلی ها، تونوفیلامنت ها، دسموزوم ها، هر گونه میتوکندری، گلژی به خوبی توسعه یافته و لیزوزوم های ناهمگن را نشان داد.

اطلاعات نگهداری

دستورالعمل باز کردن و ذخیره سازی

1- تمام ظروف را از نظر نشتی یا شکستگی بررسی کنید.

2- سلول های یخ زده را از بسته بندی یخ خشک خارج کرده و بلافاصله سلول ها را در دمای زیر 130- درجه سانتی گراد ترجیحاً در بخار نیتروژن مایع قرار دهید تا آماده استفاده شود.

محیط کامل

محیط پایه برای این رده سلولی (EMEM) Eagle’s Minimum Essential Medium

برای ساختن محیط رشد کامل، سرم جنین گاوی به غلظت نهایی 10%را به محیط پایه اضافه کنید.

درجه حرارت

37 درجه

شرایط نگهداری

برای اطمینان از بالاترین سطح زنده ماندن، ویال را ذوب کرده و در اسرع وقت پس از دریافت، کشت را آغاز کنید. اگر در بدو ورود، ادامه نگهداری کشت منجمد ضروری باشد، باید در فاز بخار نیتروژن مایع و نه در دمای 70- درجه سانتی گراد نگهداری شود. نگهداری در دمای 70- درجه سانتیگراد باعث از بین رفتن قابلیت زنده ماندن می شود.

1- ویال را با هم زدن ملایم در حمام آب 37 درجه سانتی گراد ذوب کنید. برای کاهش احتمال آلودگی، O-ring و کلاهک را خارج از آب نگهدارید. ذوب شدن باید سریع باشد (تقریباً 2 دقیقه).

2- به محض ذوب شدن محتویات، ویال را از حمام آب خارج کرده و با غوطه ور کردن یا پاشیدن با اتانول 70 درصد آن را ضدعفونی کنید. تمام عملیات از این نقطه به بعد باید در شرایط سخت اسپتیک انجام شود.

3- محتویات ویال را به یک فلاسک کشت بافت 75 سانتی متر مربعی منتقل کنید و با محیط کشت کامل توصیه شده رقیق کنید (اطلاعات دسته ای خاص را برای نسبت رقت توصیه شده ببینید). مهم است که از قلیایی بودن بیش از حد محیط در طول بازیابی سلول ها جلوگیری شود. پیشنهاد می شود، قبل از افزودن محتویات ویال، ظرف کشت حاوی محیط رشد حداقل به مدت 15 دقیقه در انکوباتور قرار داده شود تا محیط به pH طبیعی خود (7/0 تا 7/6) برسد.

4- کشت را در دمای 37 درجه سانتی گراد در انکوباتور مناسب انکوبه کنید. در صورت استفاده از محیطی که در این برگه محصول توضیح داده شده است، %5 CO₂ در جو هوا توصیه می شود.

اگر مایل هستید که عامل محافظ انجماد فوراً حذف شود یا سوسپانسیون سلولی غلیظ تری به دست آید، سوسپانسیون سلولی را در حدود g125 به مدت 5 تا 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید. مایع رویی را دور بریزید و سلول ها را با محیط رشد تازه با نسبت رقت توصیه شده در اطلاعات دسته خاص، مجدداً معلق کنید.

روش پاساژ دادن

حجم ها برای یک فلاسک 75 سانتی متر مربع داده شده است. مقدار محیط تفکیک مورد نیاز را متناسب با ظروف کشت با اندازه های دیگر افزایش یا کاهش دهید.

1- محیط کشت را بردارید و دور بریزید.

2- به طور خلاصه لایه سلولی را با محلول 0/25% تریپسین و 0/53 میلی مولار EDTA شستشو دهید تا تمام آثار سرمی حاوی مهارکننده تریپسین پاک شود.

3- 2 تا 3 میلی لیتر محلول Trypsin-EDTA را به فلاسک اضافه کنید و سلول ها را زیر میکروسکوپ معکوس مشاهده کنید تا لایه سلولی پراکنده شود (معمولاً در عرض 5 تا 15 دقیقه).

توجه: برای جلوگیری از انباشته شدن، سلول ها را با ضربه زدن یا تکان دادن فلاسک تکان ندهید در حالی که منتظر جدا شدن سلول ها هستید. سلول هایی که به سختی جدا می شوند ممکن است در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار داده شوند تا پراکندگی آنها تسهیل شود.

4- 6 تا 8 میلی لیتر از محیط رشد کامل را اضافه کنید و سلول ها را با پیپت کردن به آرامی آسپیره کنید.

5- مقدار مناسبی از سوسپانسیون سلولی را به رگ های کشت جدید اضافه کنید.

6- کشت ها را در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه کنید.

نسبت پاساژ: نسبت ساب کالچر 1:4 تا 1:6 توصیه می شود.

تعویض محیط: هر 2 تا 3 روز

مواد برای انجماد

95% محیط کامل + 5% v/v DMSO