3,300,000 تومان–4,070,000 تومان

راهنمای خرید رده سلولی C6

C6 یک رده سلولی گلیال است که از مغز موش مبتلا به گلیوما جدا شد. تومور گلیال توسط N-nitrosomethylurea پس از یک سری کشت متناوب و پاساژ حیوانات القا شد. این رده سلولی می تواند در تحقیقات علوم اعصاب و سم شناسی مورد استفاده قرار گیرد.

سطح ایمنی زیستی: BSL1 (بیشتر بدانید)

کاتالوگ انگلیسی ATCC رده سلولی C6

رویه تکمیل سفارشات

حجم فلاسک

شناسه محصول: نامعلوم دسته: رده سلولی

رده محصولات	سلول های حیوانی
ارگانیسم	موش صحرایی
مورفولوژی	سلولهای گلیال
بافت	مغز
بیماری	گلیوما
کاربردها	علوم اعصاب کشت سه بعدی غربالگری با کارایی بالا سم شناسی
شرایط نگهداری	فاز بخار نیتروژن مایع

استفاده در نظر گرفته شده

این محصول فقط برای استفاده تحقیقات آزمایشگاهی در نظر گرفته شده است. این برای هیچ گونه استفاده درمانی حیوانی یا انسانی، مصرف انسانی یا حیوانی، یا هر گونه استفاده تشخیصی در نظر گرفته نشده است.

حجم فلاسک	T25, T75

خصوصیات

خصوصیات رشد	چسبنده

استخراج	سویه سلول گلیال، C6، از یک تومور گلیال موش القا شده توسط N-nitrosomethylurea توسط Benda و همکارانش کلون شد.
کاریوتایپ	عدد پایه دیپلوئید است. کاریوتایپ در تعداد ثابت و مربوط به یک مرد نرمال است. سه سلول با شکست. یکی با انقباض ثانویه، یکی با دو مرکزی، دیگری با بازآرایی و چهار با پیوندهای پایانی یا سانترومر. بی ثباتی سیتوژنتیک در مقالات برای برخی از رده های سلولی گزارش شده است.
حساسیت به ویروس	Vaccinia virus Vesicular stomatitis, Orsay (Indiana) Vesicular stomatitis, Glasgow (Indiana) Herpes simplex virus
بیان کننده ژنهای	پروتئین S-100؛ گلیسریل فسفات دهیدروژناز در پاسخ به گلوکوکورتیکوئیدها. سوماتوتروفین
مارکرهای بیانی	رسپتور گلوکوکورتیکوئید
نظرات	تولید S-100 با رشد سلول ها از چگالی کم با رسیدن به تراکم سلولی، ده برابر افزایش می یابد.

اطلاعات نگهداری

دستورالعمل باز کردن و ذخیره سازی

1- تمام ظروف را از نظر نشتی یا شکستگی بررسی کنید.

2- سلول های یخ زده را از بسته بندی یخ خشک خارج کرده و بلافاصله سلول ها را در دمای زیر 130- درجه سانتی گراد ترجیحاً در بخار نیتروژن مایع قرار دهید تا آماده استفاده شود.

محیط کامل

محیط پایه برای این رده سلولی DMEM High glucose

برای ساختن محیط رشد کامل، سرم جنین گاوی به غلظت نهایی 10%را به محیط پایه اضافه کنید.

درجه حرارت

37 درجه

شرایط نگهداری

برای اطمینان از بالاترین سطح زنده ماندن، ویال را ذوب کرده و در اسرع وقت پس از دریافت، کشت را آغاز کنید. اگر در بدو ورود، ادامه نگهداری کشت منجمد ضروری باشد، باید در فاز بخار نیتروژن مایع و نه در دمای 70- درجه سانتی گراد نگهداری شود. نگهداری در دمای 70- درجه سانتیگراد باعث از بین رفتن قابلیت زنده ماندن می شود.

1- ویال را با هم زدن ملایم در حمام آب 37 درجه سانتی گراد ذوب کنید. برای کاهش احتمال آلودگی، O-ring و کلاهک را خارج از آب نگهدارید. ذوب شدن باید سریع باشد (تقریباً 2 دقیقه).

2- به محض ذوب شدن محتویات، ویال را از حمام آب خارج کرده و با غوطه ور کردن یا پاشیدن با اتانول 70 درصد آن را ضدعفونی کنید. تمام عملیات از این نقطه به بعد باید در شرایط سخت اسپتیک انجام شود.

3- محتویات ویال را به یک فلاسک کشت بافت 75 سانتی متر مربعی منتقل کنید و با محیط کشت کامل توصیه شده رقیق کنید (اطلاعات دسته ای خاص را برای نسبت رقت توصیه شده ببینید). مهم است که از قلیایی بودن بیش از حد محیط در طول بازیابی سلول ها جلوگیری شود. پیشنهاد می شود، قبل از افزودن محتویات ویال، ظرف کشت حاوی محیط رشد حداقل به مدت 15 دقیقه در انکوباتور قرار داده شود تا محیط به pH طبیعی خود (0/7 تا 6/7) برسد.

4- کشت را در دمای 37 درجه سانتی گراد در انکوباتور مناسب انکوبه کنید. در صورت استفاده از محیطی که در این برگه محصول توضیح داده شده است، %5 CO₂ در جو هوا توصیه می شود.

اگر مایل هستید که عامل محافظ انجماد فوراً حذف شود یا سوسپانسیون سلولی غلیظ تری به دست آید، سوسپانسیون سلولی را در حدود g125 به مدت 5 تا 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید. مایع رویی را دور بریزید و سلول ها را با محیط رشد تازه با نسبت رقت توصیه شده در اطلاعات دسته خاص، مجدداً معلق کنید.

روش پاساژ دادن

حجم ها برای یک فلاسک 75 سانتی متر مربع داده شده است. مقدار محیط تفکیک مورد نیاز را متناسب با ظروف کشت با اندازه های دیگر افزایش یا کاهش دهید.

1- محیط کشت را بردارید و دور بریزید.

2- به طور خلاصه لایه سلولی را با محلول 0/25% تریپسین و 0/53 میلی مولار EDTA شستشو دهید تا تمام آثار سرمی حاوی مهارکننده تریپسین پاک شود.

3- 2 تا 3 میلی لیتر محلول Trypsin-EDTA را به فلاسک اضافه کنید و سلول ها را زیر میکروسکوپ معکوس مشاهده کنید تا لایه سلولی پراکنده شود (معمولاً در عرض 5 تا 15 دقیقه).

توجه: برای جلوگیری از انباشته شدن، سلول ها را با ضربه زدن یا تکان دادن فلاسک تکان ندهید در حالی که منتظر جدا شدن سلول ها هستید. سلول هایی که به سختی جدا می شوند ممکن است در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار داده شوند تا پراکندگی آنها تسهیل شود.

4- 6 تا 8 میلی لیتر از محیط رشد کامل را اضافه کنید و سلول ها را با پیپت کردن به آرامی آسپیره کنید.

5- مقدار مناسبی از سوسپانسیون سلولی را به ظروف کشت جدید اضافه کنید.

6- کشت ها را در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه کنید.

نسبت پاساژ: نسبت ساب کالچر 1:2 تا 1:3توصیه می شود.

تعویض محیط: 2 تا 3 بار در هفته

مواد برای انجماد

95% محیط کامل + 5% v/v DMSO