ابزار و وسایل آزمایشگاهی شامل، محلول ها کیت ها
رنگ هوچست چیست؟ Hoechst stain
رنگ های Hoechst بخشی از خانواده رنگ های فلورسنت آبی است که برای رنگ آمیزی DNA استفاده می شود. این Bis-benzimides ها در اصل توسط Hoechst AG تولید شده اند، که تمام ترکیبات آن ها را شماره گذاری کرده است. به طوری که رنگ Hoechst 33342، 33342 ترکیب ساخته شده توسط این شرکت است. سه رنگ مربوط به Hoechst وجود دارد: Hoechst 33258، Hoechst 33342 و Hoechst 34580. رنگ های Hoechst 33258 و Hoechst 33342 بیشترین مواردی هستند که از آن ها استفاده می شوند و دارای طیف های تهییج – انتشار هستند.
خواص مولکولی
هر دو رنگ با نور ماورابنفش در حدود 350 نانومتر تحریک می شود و هر دو در حدود حداکثر طیف انتشار 461 نانومتر نور فلورسنت آبی را ساطع می کنند. رنگ متصل نشده حداکثر میزان انتشار فلورسانس خود را در محدوده 510 – 541 نانومتر دارد. رنگ های Hoechst می توانند با لامپ زنون یا جیوه ای یا لیزر ماورا بنفش تهییج شوند. شدت فلورسانس رنگ های Hoechst نیز با pH حلال افزایش می یابد.
رنگ های Hoechst در آب و حلال های آلی مانند دی متیل فرمامید یا دی متیل سولفوکسید حل می شوند. غلظت آن می تواند حداکثر به 10 میلی گرم در میلی لیتر برسد. محلول های حل شده در آب، در صورت محافظت در برابر نور، حداقل برای شش ماه در دمای 2-6 درجه سانتیگراد پایدار هستند. برای ذخیره سازی طولانی مدت، محلول ها در عوض در دمای منفی 20 درجه سانتیگراد یا کمتر منجمد می شوند.
رنگ ها به شیار کوچک DNA دو رشته ای اتصال می یابند و به توالی غنی از آدنین و تیمین متصل می شوند. اگرچه رنگ ها می توانند به تمام اسیدهای نوکلئیک متصل شوند، رشته های DNA دو رشته ای غنی از AT باعث افزایش چشمگیر فلورسانس می شوند. رنگ های Hoechst دارای قابلیت نفوذپذیری در سلول هستند و می توانند در سلول های زنده یا فیکس شده نفوذ کرده و به DNA آن ها متصل شوند.
کاربرد
غلظت 0.1–12 μg/ml معمولاً برای رنگ آمیزی DNA در باکتری ها یا سلول های یوکاریوتی استفاده می شود. سلول ها به مدت 30-1 دقیقه در دمای اتاق یا 37 درجه سانتیگراد رنگ آمیزی می شوند و سپس برای از بین بردن رنگ های متصل نشده شست و شو داده می شوند. اگر نمونه ها با مقدار زیادی رنگ شست و شو داده شوند، یک فلورسانس سبز ناشی از رنگ های متصل نشده ممکن است مشاهده شود. این ماده رنگی، اغلب به عنوان جایگزین رنگ های دیگر اسید نوکلئیک مانند DAPI استفاده می شود.
تفاوت های کلیدی بین رنگ های Hoechst و DAPI عبارتند از:
- رنگ های Hoechst به اندازه DAPI سمی نیستند، که زنده ماندن بالاتر سلول های رنگ آمیزی شده را تضمین می کند.
- گروه اتیل اضافی در رنگ های Hoechst باعث نفوذ پذیری بیشتر در سلول ها می شود.
- رنگ های مخصوص رنگ آمیزی هسته وجود دارد که باعث زنده ماندن سلول ها پس از رنگ آمیزی می شود.
جهت خرید و یا استعلام قیمت با ما تماس بگیرید یا در واتسپ پیام بزارید
