خالص سازی از روی ژل

معمولا برای داشتن محصولی تمیز از وکتور و ژن، بعد از استخراج پلازمید و هضم آنزیمی ژن و وکتور، آن ها را بر روی ژل لود کرده و از روی ژل خالص سازی را انجام می دهیم (خالص سازی از روی ژل) و برای مرحله بعد که ligation است استفاده می کنیم.

این تصویر دارای صفت خالی alt است؛ نام پروندهٔ آن why-us.gif است

🔴 زمان تحویل: 7 روز کاری 🔴 نحوه محاسبه قیمت: برای اطلاع از قیمت با آزمایشگاه تماس بگیرید

نحوه‌ی تحویل پروژه خالص سازی از روی ژل:

محصولات خالص‌سازی شده در تیوب‌های استریل که غلظت آنها مشخص شده است تحویل داده می‌شود.

در رابطه با خالص سازی از روی ژل بیشتر بدانیم:

در زیست‌شناسی مولکولی، استخراج ژل یا جداسازی ژل تکنیکی است که برای جداسازی قطعه مورد نظر از DNA دست نخورده از ژل آگارز به دنبال الکتروفورز ژل آگارز استفاده می‌شود. پس از استخراج، قطعات مورد نظر را می‌توان در چندین مرحله ساده با هم مخلوط، رسوب داد و به صورت آنزیمی چسباند.

خالص سازی از روی ژل

این فرآیند که معمولاً روی پلاسمیدها انجام می‌شود، اساس مهندسی ژنتیک ابتدایی است. پس از اجرای نمونه‌های DNA روی ژل آگارز، استخراج شامل چهار مرحله اساسی است: شناسایی قطعات مورد نظر، جداسازی باندهای مربوطه، جداسازی DNA از آن باندها، و حذف نمک‌ها و لکه‌های همراه. برای شروع، نور UV به ژل تابیده می شود تا تمام DNA رنگ آمیزی شده با اتیدیوم بروماید را روشن کند.

باید مراقب بود که از قرار گرفتن DNA در معرض تشعشعات جهش زا برای مدت طولانی‌تر از حد ضروری اجتناب شود. باند مورد نظر با یک تیغه مشخص شده و از نظر فیزیکی برداشته می‌شود. برش برداشته شده از ژل باید حاوی DNA مورد نظر در داخل آن باشد.

🔵روش کار خالص سازی از روی ژل 🔵

کیت‌های استخراج از ژل از چندین تولید کننده بزرگ بیوتکنولوژی با هزینه نهایی تقریباً 1 تا 2 دلار آمریکا برای هر نمونه در دسترس هستند. پروتکل‌های موجود در این کیت‌ها عموماً بیانگر این موضوع هستند که ابتدا باید ژل در دمای 50 درجه سانتیگراد آب شود و به دنبال آن با استفاده از کائوتروپ مناسب، الکل هفتاد درصد و آب، نمونه از ژل استخراج شود.

🔵کاربرد های خالص سازی ژل🔵

هضم آنزیمی یکی از مراحل مهم کلونینگ است که برای درست انجام شدن مراحل بعدی مانند ligation بسیار مهم می‌باشد. برای همین خیلی مهم است که وکتور و پلازمیدی که استفاده می‌شود برای ligation، خالص باشد.
خالص‌سازی هضم وکتور: بعد از هضم وکتور به دلیل این که قطعه کوچک وکتور بالای 40 جفت باز است نمی‌توان مستقیم از ستون سیلیکا استفاده کرد. برای همین به استخراج از ژل می‌پردازیم.