تکنیک رنگ آمیزی Ao/Pi

تکنیک رنگ آمیزی Ao/Pi

Acridine orange AO و یدید پروپیدیوم (PI) رنگهای متصل شونده به اسید نوکلئیک هستند که می توانند برای اندازه گیری زنده ماندنی سلول استفاده شوند. هر دو AO و PI تحریک کننده پوست محسوب می شوند و در صورت مصرف یا استنشاق ممکن است مضر باشند. آنها در حال حاضر به عنوان سرطان زا طبقه بندی نمی شوند. از آنجا که AO قابل نفوذ به سلول است، تمام هسته سلول های زنده رنگ فلورسانس سبز تولید می کنند. PI تنها سلولهایی را با غشاهای از بین رفته رنگ می کند و بنابراین سلولهای هسته ای در حال مرگ، مرده و نکروتیک با رنگ فلورسانس قرمز دیده می شوند. هنگامی که سلول ها با AO و PI رنگ آمیزی می شوند، سلولهای زنده سبز و مرده ها با رنگ قرمز فلورسانس دیده می شوند.

پروتکل:

1. محیط کشت رویی ظرف حاوی سلول را خارج می کنیم.
2. سلول ها را دو بار با PBS می شوییم.
3. سپس غلظت مناسبی از رنگ مخلوط شده ی Ao/Pi (5 mg/ml ) را به همراه PBS به سلول ها اضافه می کنیم.
4. به سرعت سلول ها را در زیر میکروسکوپ مشاهده کرده و نسب مرده به زنده را محاسبه می کنیم.

برای مطالعه سایر تکنیک آزمایشگاهی کلیک کنید.

برای مشاهده و ثبت نام دوره کارآموزی کشت سلولی اینجا کلیک کنید

برای سفارش خدمات به آزمایشگاه کشت سلول ژنیران اینجا کلیک کنید