انجام ligation

آزمایشگاه ژنیران با هدف خدمت به دانش‌پژوهان و محققین عزیز و همچنین موسسات دانش‌بنیان و تحقیقاتی آماده انجام و ارائه انواع خدمات در زمینه کلونینگ و انجام واکنش ligation برای انواع وکتورها در کمترین زمان و قیمت ممکن می‌باشد. این آزمایشگاه به منظور دست یافتن به بهترین نتیجه از کیت‌های معتبر و عالی استفاده می‌نماید.  از ویژگی‌های خوب موسسه ژنیران، داشتن کادر مجرب و با تجربه است که با بکارگیری بهترین تجهیزات آماده خدمت‌رسانی به شما عزیزان می‌باشد.

انجام LIGATION

این تصویر دارای صفت خالی alt است؛ نام پروندهٔ آن why-us.gif است

🔴 زمان تحویل: 7 روز کاری 🔴 نحوه محاسبه قیمت:برای اطلاع از قیمت با آزمایشگاه تماس بگیرید

نحوه تحویل پروژه:

واکنش ligation با کیت‌های معتبر و مناسب در آزمایشگاه ژنیران انجام می‌گیرد و محصول واکنش در تیوب‌های استریل تحویل داده می‌شود.

در رابطه با ligation بیشتر بدانیم:

 

 


به جرات می‌توان می‌توان گفت مهم‌ترین مرحله در کلونینگ، مرحله ligation است و همچنین یک سری از کارهایی که در مراحل ابتدایی انجام می‌دهیم مانند PCR ژن مورد نظرمان، همه برای این است که کارایی مرحله ligation بالا برود. در واکنش ligation موادی که استفاده می‌شود شامل ژن هضم شده،

انجام ligation

وکتور هضم شده، آب، آنزیم و بافر مربوط به آنزیم است. آنزیم لیگاز مربوط به باکتری‌ها با یوکاریوت‌ها از این جهت متفاوت است که کوفاکتور مورد نیاز برای آنزیم لیگاز پروکاریوت‌ها، نیاز به کوفاکتور ATP دارد و لیگاز مربوط به یوکاریوت‌ها نیاز به کوفاکتور NADH دارد. این آنزیم پیوند فسفودی استر را بین  5’pیک نوکلئوتید با 3’OH نوکلئوتید مجاور برقرار می‎کند.

در ابتدا آنزیم از طریق آمینواسید آرژنین خود، با فسفات گاما ATP پیوند برقرار کرده و یک پیروفسفات آزاد می شود. سپس 3’OH سر آزاد رشته مقابل به فسفات حمله کرده و فسفات از فسفات گاما کوفاکتور جدا و با 3’OH پیوند فسفودی استری جدید می‎دهد. اکثر واکنش ها در حجم 10 ماکرولیتر بسته می شود. متناسب با  طول توالی ژن هدف و طول توالی  وکتور، میزان مشخصی، طبق فرمول زیر از هر کدام با هم مخلوط و در تماس با مخلوط آنزیمی برای اتصال قرار می‌گیرند

 

🔵روش کار🔵

متناسب با دستور‌العمل هر آنزیم عمل می‌شود. اکثر واکنش‌ها در حجم 20 ماکرولیتر بسته می‌شود. متناسب با  طول توالی و ترکیبات ژن هدف و طول ترکیبات توالی وکتور، میزان مشخصی طبق فرمول مربوط به LIGATION از هر کدام با هم مخلوط و در تماس با مخلوط آنزیمی برای اتصال قرار می‌گیرند.

🔵کاربردهای خالص سازی ژل در تحقیقات🔵

ligation مهم‌ترین مرحله کلونینگ است و باید با دقت لازم انجام شود که برای وارد کردن ژن به داخل وکتور و یا متصل کردن قطعات  DNA استفاده می‌شود.

تجهیزات مرتبط با ligation

 

سمپلر ، میکروتیوب 0.2 ، هات بلاک

خدمات آزمایشگاه مهندسی ژنتیک وپروتئین ژنیران

آزمایشگاه مهندسی ژنتیک ژنیران

دوره کارآموزی مهندسی ژنتیک و کلونینگ ژنیران

دیدگاهتان را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *