دیدگاه‌ها برای: روش های الکتروفورز محصول PCR (آگارز و آکریل آمید) https://www.geniranlab.ir/%d8%b1%d9%88%d8%b4-%d9%87%d8%a7%db%8c-%d8%a7%d9%84%da%a9%d8%aa%d8%b1%d9%88%d9%81%d9%88%d8%b1%d8%b2-%d9%85%d8%ad%d8%b5%d9%88%d9%84-pcr-%d8%a2%da%af%d8%a7%d8%b1%d8%b2-%d9%88-%d8%a2%da%a9%d8%b1%db%8c/ آزمایشگاه ژنتیک،بیوتکنولوژی،بیوانفورماتیک|کارآموزی|مهارت آموزی|خدمات|پایان نامه Wed, 09 Apr 2025 11:54:26 +0000 hourly 1 https://wordpress.org/?v=6.8.8 توسط: Farbod Esfandi https://www.geniranlab.ir/%d8%b1%d9%88%d8%b4-%d9%87%d8%a7%db%8c-%d8%a7%d9%84%da%a9%d8%aa%d8%b1%d9%88%d9%81%d9%88%d8%b1%d8%b2-%d9%85%d8%ad%d8%b5%d9%88%d9%84-pcr-%d8%a2%da%af%d8%a7%d8%b1%d8%b2-%d9%88-%d8%a2%da%a9%d8%b1%db%8c/comment-page-1/#comment-13108 Tue, 12 Mar 2024 10:58:31 +0000 https://www.geniranlab.ir/?page_id=3434#comment-13108 در پاسخ به Farbod Esfandi.

وقتی با مشکل در دریافت باندهای شارپ در PCR گرادیانت مواجه می‌شوید و مشکل از cDNA نیست (چون با پرایمر‌های دیگر نتایج خوبی داشته‌اید)، موارد زیر را برای بهبود وضعیت باندهای PCR بررسی و امتحان کنید:

بررسی طراحی پرایمر: اطمینان حاصل کنید که پرایمرها به درستی طراحی شده‌اند. پرایمرها باید دارای Tm (دمای ذوب) مناسب و همچنین طول و ترکیب GC مناسب باشند. از وجود هرگونه ساختارهای ثانویه یا دیمرهای پرایمر که می‌تواند باعث اختلال شود، جلوگیری کنید.

اصلاح غلظت مگنزیم: MgCl2 در فعال‌سازی آنزیم Taq پلیمراز نقش دارد و غلظت آن می‌تواند بر کیفیت PCR تأثیر بگذارد. امتحان کردن غلظت‌های مختلف مگنزیم ممکن است به شما کمک کند تا به باند شارپ‌تری دست یابید.

تنظیم غلظت پرایمر: گاهی اوقات غلظت پرایمر بیش از حد بالا یا پایین می‌تواند بر کیفیت PCR تأثیر بگذارد. تنظیم غلظت پرایمر ممکن است نیاز به آزمون و خطا داشته باشد.

بهینه‌سازی دوره‌های ترموسایکلینگ: تنظیم دقیق دما و زمان‌های دوره‌های ترموسایکلینگ می‌تواند به بهبود نتایج کمک کند. ممکن است نیاز باشد زمان تمدید یا تعداد چرخه‌ها را تغییر دهید.

استفاده از افزودنی‌ها: گاهی اوقات افزودن موادی مانند DMSO یا بتائین به مخلوط واکنش می‌تواند به کاهش ساختارهای ثانویه در تمپلیت و بهبود باند کمک کند.

کنترل کیفیت cDNA و تمپلیت: حتی اگر با cDNA دیگری موفقیت داشته‌اید، همچنان کیفیت و غلظت cDNA مورد استفاده برای پرایمرهای جدید را بررسی کنید. اطمینان حاصل کنید که cDNA به اندازه کافی غنی و بدون آسیب است.

تجدید نظر در طراحی پرایمر: اگر هیچ یک از تغییرات بالا کمک نکرد، ممکن است لازم باشد طراحی پرایمرها را مجدداً بررسی کنید یا حتی پرایمرهای جدیدی طراحی کنید.

انجام این بهینه‌سازی‌ها می‌تواند به شما کمک کند تا به نتایج بهتری در PCR خود دست یابید. همچنین، مشورت با همکاران یا مراجعه به منابع تخصصی می‌تواند ایده‌های ارزشمندی برای حل مشکل فراهم آورد.

]]> توسط: کاربر ژنیران https://www.geniranlab.ir/%d8%b1%d9%88%d8%b4-%d9%87%d8%a7%db%8c-%d8%a7%d9%84%da%a9%d8%aa%d8%b1%d9%88%d9%81%d9%88%d8%b1%d8%b2-%d9%85%d8%ad%d8%b5%d9%88%d9%84-pcr-%d8%a2%da%af%d8%a7%d8%b1%d8%b2-%d9%88-%d8%a2%da%a9%d8%b1%db%8c/comment-page-1/#comment-5833 Sat, 01 Jul 2023 14:45:50 +0000 https://www.geniranlab.ir/?page_id=3434#comment-5833 سلام وقتتون بخیر
من برای ستاپ پرایمرم pcr گرادیانت گذاشتم اما اصلا در هیچ دمایی باند شارپ نداد cdna رو عوض کردم و با پرایمر های قبلیم چک کردم اون ها اوکی بودن اما این جدید مشکل داره پیشنهاپتون چیه برای تقویت باند؟

]]> توسط: Farbod Esfandi https://www.geniranlab.ir/%d8%b1%d9%88%d8%b4-%d9%87%d8%a7%db%8c-%d8%a7%d9%84%da%a9%d8%aa%d8%b1%d9%88%d9%81%d9%88%d8%b1%d8%b2-%d9%85%d8%ad%d8%b5%d9%88%d9%84-pcr-%d8%a2%da%af%d8%a7%d8%b1%d8%b2-%d9%88-%d8%a2%da%a9%d8%b1%db%8c/comment-page-1/#comment-5231 Sun, 11 Jun 2023 12:49:39 +0000 https://www.geniranlab.ir/?page_id=3434#comment-5231 در پاسخ به Farbod Esfandi.

سلام،
طبیعی است که پرایمر با سایز حدود 20 تا 25 نوکلئوتید پایین تر از آخرین خط لدر (در صورتی که از لدر 50 bp استفاده می‌کنید) قرار گیرد.

]]> توسط: کاربر ژنیران https://www.geniranlab.ir/%d8%b1%d9%88%d8%b4-%d9%87%d8%a7%db%8c-%d8%a7%d9%84%da%a9%d8%aa%d8%b1%d9%88%d9%81%d9%88%d8%b1%d8%b2-%d9%85%d8%ad%d8%b5%d9%88%d9%84-pcr-%d8%a2%da%af%d8%a7%d8%b1%d8%b2-%d9%88-%d8%a2%da%a9%d8%b1%db%8c/comment-page-1/#comment-5221 Sun, 11 Jun 2023 00:59:21 +0000 https://www.geniranlab.ir/?page_id=3434#comment-5221 سلام وقت بخیر..ببخشید پرایمر من هنگام تست روی ژل افقی باند تشکیل داده ولی وقتی روی ژل عمودی گذاشتم باندهای کلفتی پایین تر از خط لدر تشکیل شد علتش چی میتونه باشه؟

]]> توسط: Farbod Esfandi https://www.geniranlab.ir/%d8%b1%d9%88%d8%b4-%d9%87%d8%a7%db%8c-%d8%a7%d9%84%da%a9%d8%aa%d8%b1%d9%88%d9%81%d9%88%d8%b1%d8%b2-%d9%85%d8%ad%d8%b5%d9%88%d9%84-pcr-%d8%a2%da%af%d8%a7%d8%b1%d8%b2-%d9%88-%d8%a2%da%a9%d8%b1%db%8c/comment-page-1/#comment-4057 Wed, 15 Mar 2023 12:35:03 +0000 https://www.geniranlab.ir/?page_id=3434#comment-4057 در پاسخ به Farbod Esfandi.

با سلام، موارد زیر را می‌توانید امتحان کنید:
1. محصول را تا 25 نانوگرم در ماکرولیتر رقیق کنید.
2. آگارز را به یک درصد برسانید.
3. از درست کار کردن پاورسوپلای و اتصالات برقی آن اطمینان حاصل کنید.

]]> توسط: کاربر ژنیران https://www.geniranlab.ir/%d8%b1%d9%88%d8%b4-%d9%87%d8%a7%db%8c-%d8%a7%d9%84%da%a9%d8%aa%d8%b1%d9%88%d9%81%d9%88%d8%b1%d8%b2-%d9%85%d8%ad%d8%b5%d9%88%d9%84-pcr-%d8%a2%da%af%d8%a7%d8%b1%d8%b2-%d9%88-%d8%a2%da%a9%d8%b1%db%8c/comment-page-1/#comment-4055 Wed, 15 Mar 2023 11:45:47 +0000 https://www.geniranlab.ir/?page_id=3434#comment-4055 سلام علت گیر کردن محصول پی سی ار در چاهک ژل چیه؟
حتی محصول رو رقیق کردیم و درصد ژل رو پایین اوردیم باز جواب نگرفتیم

]]> توسط: Admin https://www.geniranlab.ir/%d8%b1%d9%88%d8%b4-%d9%87%d8%a7%db%8c-%d8%a7%d9%84%da%a9%d8%aa%d8%b1%d9%88%d9%81%d9%88%d8%b1%d8%b2-%d9%85%d8%ad%d8%b5%d9%88%d9%84-pcr-%d8%a2%da%af%d8%a7%d8%b1%d8%b2-%d9%88-%d8%a2%da%a9%d8%b1%db%8c/comment-page-1/#comment-2715 Sat, 17 Dec 2022 07:10:16 +0000 https://www.geniranlab.ir/?page_id=3434#comment-2715 در پاسخ به Admin.

سلام دوست عزیز
شما میتوانید در دوره کارآموزی ژنتیک مولکولی شرکت کنید برای اطلاعات بیشتر و مشاوره رایگان با آزمایشگاه تماس بگیرید. همچنین میتوانید صفحه زیر را مطالعه کنید.(کلیک کنید)
کارآموزی ژنتیک مولکولی

]]> توسط: کاربر ژنیران https://www.geniranlab.ir/%d8%b1%d9%88%d8%b4-%d9%87%d8%a7%db%8c-%d8%a7%d9%84%da%a9%d8%aa%d8%b1%d9%88%d9%81%d9%88%d8%b1%d8%b2-%d9%85%d8%ad%d8%b5%d9%88%d9%84-pcr-%d8%a2%da%af%d8%a7%d8%b1%d8%b2-%d9%88-%d8%a2%da%a9%d8%b1%db%8c/comment-page-1/#comment-2694 Wed, 14 Dec 2022 18:37:08 +0000 https://www.geniranlab.ir/?page_id=3434#comment-2694 باسلام
بنده می‌خوام در کارگاه آموزشی استخراج DNA و PCR و الکتروفورز باطل آگارز شرکت کنم لطفاً تاریخ و زمان برگزاری کارگاه و همچنین هزینه شرکت در کارگاه را اعلام فرمایید.باسپاس

]]>