استخراج پلازمید

تخلیص پلازمیدها از کشت باکتری و سلول های یوکاریوتی مانند روش کلی تهیه کل DNA از سلول است. سلول ‌های باکتریایی و یوکاریوتی در محیط کشت رشد داده می‌شوند و بعد از گرفتن رسوب سلول ها لازم است که DNA پلازمیدی از مقدار زیادی DNA باکتریایی موجود در سلول جدا شود.آزمایشگاه ژنیران با هدف خدمت به دانش‌پژوهان و محققین عزیز و همچنین موسسات دانش‌بنیان و تحقیقاتی آماده انجام و ارائه انواع خدمات در زمینه پلازمید از انواع گونه‌های باکتریایی و یوکاریوتی در کمترین زمان و قیمت ممکن می‌باشد. این آزمایشگاه به منور دست یافتن به خالص‌ترین نوع پلازمید از کیت‌های معتبر و عالی استفاده می‌نماید و در صورت عدم امکان استخراج پلازمید بوسیله کیت استخراج در مواردی مانند بزرگ بودن پلازمید، از روش‌های دستی مطمين برای این کار استفاده می‌نماید.  از ویژگی‌های خوب موسسه ژنیران، داشتن کادر مجرب و با تجربه است که با بکارگیری بهترین تجهیزات آماده خدمت‌رسانی به شما عزیزان می‌باشد.

🔴 زمان تحویل: دو روز کاری 🔴 نحوه محاسبه قیمت:

نحوه‌ی تحویل پروژه:

استخراج پلازمید با کیت‌های معتبر و مناسب انجام می‌گیرد که بعد از استخراج، OD محصول خوانده می‌شود و همچنین باندهای مربوط به پلازمید بر روی ژل باید مشاهده می‌شود و در صورت مناسب نبودن نتایج استخراج، استخراج پلازمید دوباره تکرار می‌شود.

تجهیزات مرتبط با استخراج پلازمید

در رابطه با استخراج پلازمید بیشتر بدانیم:

تخلیص پلازمیدها از کشت باکتری مانند روش کلی تهیه کل DNA از سلول است.ابتدا سلول ‌های باکتریایی در محیط کشت رشد داده می‌شوند. رسوب سلول ها جمع آوری و یک عصاره سلولی آماده می‌شود که برای تخلیص پلازمید مورد استفاده قرار می‌گیرد. در استخراج پلازمید لازم است که DNA پلازمیدی از مقدار زیادی DNA باکتریایی موجود در سلول جدا شود.جداسازی دو DNA کار بسیار دشواری است، اما وقتی قرار است پلازمید برای کلون‌سازی مورد استفاده قرار گیرد، وجود کمترین میزان آلودگی نتایج نامطلوبی به همراه دارد.روش‌های جداسازی پلازمید بر اساس تفاوت‌های فیزیکی بین پلازمید و DNA باکتری طراحی شده است.

جداسازی بر اساس اندازه

پلازمید از لحاظ اندازه چیزی حدود هشت درصد اندازه DNA باکتریایی است که از این خاصیت برای جداسازی استفاده می‌شود. در این روش سلول‌ها تحت شرایط کنترل شده تجزیه شده که در نهایت تعداد کمی از DNA سلول شکسته شده  که حتی در این حالت هم از پلازمید بزرگتر است. پس از لیز سلولی، سانتریفوژ باعث رسوب DNA باکتری و عصاره سلولی می‌شود و پلازمید در محیط رویی باقی می‌ماند.

جداسازی بر اساس ساختار فضایی

این مطلب که پلازمیدها دارای ساختار حلقوی هستند درست نیست. بیشتر پلازمیدها در سلول به شکل مولکول‌های ابرمارپیچ وجود دارند که در حالت طبیعی به آن حلقوی بسته کولانسی گفته می‌شود و چنانچه در صورت ایجاد شکست در یکی از رشته‌ها ساختار دیگری به نام ساختار حلقه باز شکل میگیرد.این ساختار فضایی در جداسازی پلازمید دارای اهمیت است که از دو روش دناتوره کردن قلیایی و اتیدیوم بروماید – سزیم کلرید استفاده می‌شود.

کاربردهای استخراج پلازمید در تحقیقات

استخراج پلازمید یکی از اولین مراحل کلونینگ است که برای درست انجام شدن مراحل بعدی مانند هضم آنزیمی و ligation بسیار مهم می‌باشد.

 

خدمات آزمایشگاه مهندسی ژنتیک وپروتئین ژنیران

دوره کارآموزی مهندسی ژنتیک و کلونینگ ژنیران

آزمایشگاه مهندسی ژنتیک ژنیران